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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
80
- 英文名:
Protease inhibitor cocktail for general use
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1mL|1mL×5
特别提示:包括通用型蛋白酶抑制剂混合物在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:通用型蛋白酶抑制剂混合物
英文名称:Protease inhibitor cocktail for general use
产品货号:YT964
产品规格:1mL|1mL×5
本产品是一种通用型用于细胞或组织蛋白提取等的蛋白酶抑制剂混合物(200mMAEBSF,30μMAprotinin,13mM Bestatin,1.4mM E64 and 1mM Leupeptin in DMSO),并提供独立包装的0.1MEDTA。1mL的本产品通常足够用于100ml裂解液的配制。
细胞或组织提取物等样品中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物等样品中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品为经优化和测试的用于常规细胞或组织蛋白提取等的蛋白酶抑制剂混合物,包含了广谱的丝氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制剂、以及氨基肽酶抑制剂。具体组分与Sigma及Millipore同类产品的比较见表1。
表1.百奥莱博通用型蛋白酶抑制剂混合物(100×)与Sigma及Millipore同类产品的比较:
| 品牌 | 百奥莱博 | Sigma | Millipore |
| 产品编号 | YT964 | P2714/S8820 | 539131 |
| 产品形式 | 100X | 如配制为100X | 如配制为100X |
| AEBSF | 200mM | 200mM | 50mM |
| Aprotinin | 30μM | 30μM | 15μM |
| Bestatin | 13mM | 13mM | - |
| E64 | 1.4mM | 1.4mM | 0.1mM |
| Leupeptin | 1mM | 0.1mM | 0.1mM |
| EDTA | 100mM | 100mM | 50mM |
本蛋白酶抑制剂混合物含200mMAEBSF,30μMAprotinin,13mM Bestatin,1.4mM E64和1mM Leupeptin(参考表1),配制在高纯度DMSO中。EDTA为单独包装,以便选择性使用。如用于检测金属蛋白酶活性,则不宜添加EDTA。
本产品使用便捷,通常以1:100的比例分别把通用型蛋白酶抑制剂混合物(100×)和0.1MEDTA加入裂解液中,即可用于常规的细胞或组织蛋白的提取,并有效抑制蛋白降解。
不同类型的蛋白提取物中含有不同类型的蛋白酶。例如,哺乳动物细胞提取物中通常含有高丰度的丝氨酸蛋白酶,细菌细胞提取物通常含有较多的丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶,哺乳动物组织提取物中主要含有丝氨酸、半胱氨酸和金属蛋白酶,植物提取物中常含有大量的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶,还有一些含有天冬氨酸蛋白酶。为此百奥莱博针对不同类型样品的蛋白提取,提供了不同类型的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂混合物以供选择。
本产品可以有效抑制常规细胞或组织提取物中的各种蛋白酶活性,如丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝氨酸蛋白酶不可逆抑制剂,其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似,可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作为PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。Aprotinin是丝氨酸蛋白酶的竞争性可逆抑制剂;Bestatin是氨基肽酶可逆抑制剂;E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制剂;Leupeptin是丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶可逆抑制剂;EDTA作为螯合剂是金属蛋白酶的可逆抑制剂。
产品组成:
| 组分 | 1mL | 1mL×5 |
| 通用型蛋白酶抑制剂混合物 | 1mL | 1mL×5 |
| 0.1MEDTA,pH 8.0 | 1mL | 1mL×5 |
保存条件:-20℃保存,一年有效。
注意事项:
1.本产品可以适当分装后保存,并应在临使用前添加到裂解液等适当溶液中。
2.本产品提供了独立包装的EDTA,可以选择性使用。例如,后续用于检测提取液中金属蛋白酶活性,则不宜添加EDTA。
3.本产品中含有的蛋白酶抑制剂对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
4.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
本蛋白酶抑制剂混合物为100X的储存液,使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物),混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配,不宜配制后冻存待后续使用。根据需要,0.1M的EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中。待所需的抑制剂添加完毕并混匀后,就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。
附表2.常用蛋白酶、磷酸酶、去乙酰化酶抑制剂的具体相关信息:
| 名称 | 分子量 | 目标酶家族 | 抑制类型 |
| AEBSF | 239.5 | 丝氨酸蛋白酶 | 不可逆 |
| Aprotinin | 6511.5 | 丝氨酸蛋白酶 | 可逆 |
| Bestatin | 308.38 | 氨基肽酶 | 可逆 |
| E64 | 357.4 | 半胱氨酸蛋白酶 | 不可逆 |
| Leupeptin | 475.6 | 丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶 | 可逆 |
| Pepstatin A | 685.9 | 天冬氨酸蛋白酶 | 可逆 |
| EDTA | 372.24 | 金属蛋白酶 | 可逆 |
| Phenanthroline | 198.22 | 金属蛋白酶 | 可逆 |
| Phosphoramidon | 587.5 | 金属蛋白酶 | 可逆 |
| Sodium fluoride | 41.99 | 酸性磷酸酶 | 可逆 |
| Sodium pyrophosphate | 221.9 | 丝氨酸/苏氨酸磷酸酶 | 不可逆 |
| β-glycerophosphate | 306.11 | 丝氨酸/苏氨酸磷酸酶 | 可逆 |
| Imidazole | 68.2 | 碱性磷酸酶 | 可逆 |
| Sodium molybdate | 205.9 | 酸性磷酸酶 | 不可逆 |
| Sodium tartrate dihydrate | 230.1 | 酸性磷酸酶 | 可逆 |
| Sodium orthovanadate | 183.91 | 碱性和酪氨酸磷酸酶 | 可逆 |
| (-)-p-Bromotetramisole oxalate | 373.22 | 碱性磷酸酶 | 不可逆 |
| Cantharidin | 196.20 | 蛋白lín酸酶2A | 可逆 |
| Microcystin-LR | 995.17 | 蛋白lín酸酶1和蛋白lín酸酶2A | 可逆 |
| Calyculin A | 1009.17 | 蛋白lín酸酶1和蛋白lín酸酶2A | 可逆 |
| Trichostatin A | 302.37 | class I/II HDAC | 可逆 |
| EX-527 | 248.71 | SIRT1 over SIRT2 & SIRT3 | 可逆 |
| Nicotinamide | 122.12 | class III HDAC | 可逆 |
| Sodium butyrate | 110.09 | class I/II HDAC | 可逆 |
我公司销售的通用型蛋白酶抑制剂混合物报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验批次间稳定一致 重组抗体源于一段只编码一种重链和轻链的DNA序列,从而确保抗体的超高纯度。标准化的培养条件下,由哺乳动物细胞表达,保证了抗体质量的批次间稳定性。 图1:对抗体进行质谱分析,数据表明:REAfinity抗体纯度非常高,而杂交瘤来源的抗体是一种混合物。(A)对两个杂交瘤来源的单克隆抗体样本进行质谱分析,可以看出,它们都含有一条分子量接近23,635Da的污染轻链。(B)两个REAfinity抗体样本的质谱分析结果显示,其含有极高纯度的轻链。 通用型同型
,直到全部溶解,用 HCl 调节 PH 值到 7.4; 2.加 10 ml 10% 的 NP-40; 3.加 2.5 ml 10% 的去氧胆酸钠,搅拌,直到溶液澄清; 4.加 1 ml 100 mM 的 EDTA,用量筒定容到 100 ml,2~8 ℃ 保存; 5.理论上,蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂应该在使用当天同时加入(抑蛋白酶肽,亮抑酶肽, 胃蛋白酶抑制剂各 100 μl;PMSF,Na3VO4,NaF 各 500 μl),但是 PMSF 在水溶液中很不稳定,30 分钟就会降解一半,所以 PMSF 应该
核蛋白提取 实验准备: 1 4℃离心机 2 根据标本数计算所需I,II,III,IV总体积,取出液体,并加入蛋白酶抑制剂,(III由加蛋白酶抑制剂I与加蛋白酶抑制剂II混合物) 实验操作: 1 收集细胞。10ml 对照细胞(1-2*105/ml )培养48h后,15ml 离心管收集,300g(1370 rpm)* 5min。弃上清,加1ml 1*PBS轻轻涡旋混匀后转移至1.5ml EP管。 2 4℃,300g * 5min,弃上清。 3 重悬
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