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- 百奥莱博
- ZN1877-SRO
- 北京
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
321
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1ml×6
特别提示：包括SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(2×)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(2×)
产品货号：ZN1877
产品规格：1ml×6
产品保存：-20℃保存，一年有效
产品说明：SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液,是一种以溴酚蓝为染料的2倍浓液的蛋白上样缓冲液，试剂中含有SDS，DTT，甘油，溴酚蓝，Tris-HCL缓冲液等，可用于常规的SDS－PAGE变性蛋白样品上样。
使用方法：
1.按 1 体积蛋白样品加入 1 体积蛋白上样缓冲液即 1：1的比例，混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(2×)。经100℃水浴加热变性 3-5分钟后即可上样，电泳。
2.通常电泳到当溴酚蓝染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
注意事项：
1．蛋白上样缓冲液中含有少量 DTT，有轻微剌激气味。
2．在室温或不超过 37℃的水浴中溶解 SDS-PAGE 上样缓冲液。
3．为了您的安全和健康，请戴一次性手套在通风厨内操作。
除了SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(2×),，我公司还供应以下相关产品：
名称：甘油明胶封片液(Kaiser封片液)
货号：YT095
规格：10ml
本品是一种参考经典的Kaiser方法配制的水性封片液，但经过改良，不再含剧毒苯*，可以用于常规的各种切片、涂片等的封片。本甘油明胶封片液中的主要有效成分为明胶和甘油。按照每个样品封片需要50微升计算，足够用于200个样品的封片。
储存条件：4℃，有效期一年。
名称：蛋白A和G琼脂糖
货号：YT883
规格：2ml
本品主要用于免疫沉淀或免疫共沉淀，也可以用于抗体的纯化。
Protein A+G Agarose适合于免疫沉淀所有Protein A Agarose和Protein A+G Agarose单独可以免疫沉淀的抗体，包括mouse IgG1，IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, rabbit IgG, rabbit and goat polyclonal Abs，以及human IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。
Protein A和Protein G都共价交联到4% agarose beads上，2ml Protein A+G Agarose中共含有约2mg重组的Protein A+G。2 ml Protein A+G Agarose共可以结合约14mg human IgG。
Protein A+G Agarose配制在TBS溶液中，2ml中共含有0.5ml Agarose beads。
本Protein A+G Agarose如果用于常规的免疫沉淀，可以免疫沉淀100次。
注意事项：
1. 请勿冷冻保存本产品。
2. Protein A+G Agarose使用前一定要充分重悬，即充分颠倒若干次使混合均匀。
3. 从蛋白样品收集开始，所有步骤中蛋白样品都必须在4℃或冰上操作。
储存条件：4℃，有效期一年。
名称：免疫荧光试剂盒(小鼠源IgM型一抗)(FITC)
货号：ZN2929
规格：400T|800T|1600T
本试剂盒采用SABC系统，是专为免疫化学而设计的，用以显示组织或细胞中的抗原分布。SABC-FITC代表了传统的免疫荧光方法。荧光具有简便快速,不需显色既可直接观察的优点。但染色不能保存，敏感性较低是其缺点。将链霉亲和素—生物素引入荧光系统，能明显提高敏感性及降低背景。FITC 激发光波长为 490-495nm，发射光波长为 520-530nm，呈黄绿色荧光。
试剂盒组成：
| 组分 | 规格 |
| 正常浓缩山羊血清(效价1:10) | 2.5ml/5ml/10ml |
| 生物素标记羊抗小鼠IgM(效价1:100～200) | 0.25ml/0.5ml/1ml |
| SABC-FITC(效价1:100～200) | 0.25ml/0.5ml/1ml |
另附有三个滴瓶可供稀释试剂用
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
石蜡片染色步骤：
1. 切片脱蜡至水。
2. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3. 封闭：滴加稀释的正常血清封闭液(稀释比1:10),室温 20 分钟。甩干，勿洗。
4. 滴加适当稀释的一抗，37℃孵育1~2小时或4℃过夜。PBS洗5分钟×3次。
5. 滴加稀释的生物素标记羊抗小鼠IgM(参考效价1:100-200),37℃孵育 30分钟。PBS洗5分钟×3次。
6. 滴加稀释的 SABC-FITC(参考效价1:100-200)，37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×4次。
7. 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。荧光显微镜观察。
建议：
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954，与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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文献和实验现在大家都是做SDS-PAGE或者双向电泳比较多，而做非变性电泳的似乎少一些。而我本人接触非变形电泳较多，一直认为它还是很有特点的，能够有很多独特应用之处的，所以在此结合我本人经历向大家介绍一下非变性电泳。 非变性电泳，蛋白质在电泳过程中是处于非变性的，电泳时蛋白的迁移率取决于蛋白的电荷和分子量，非变性电泳在完成电泳后，可以进行蛋白质活性测定（如果是酶的话，可以进行酶活检测）或者检测同功酶，或含亚基的完整蛋白的分子量，这些特点是SDS-PAGE所不具备的，因为像SDS-PAGE使蛋白变性
到 5 ml 的 1X PBS 中。4 °C 缓慢搅拌 2 小时。离心沉淀微球，用 PBS 清洗两次。将微球重悬在 1 倍体积的 PBS 中。（处理后的微球可以在 4 °C 存放 2 周）4. 3X SDS 上样缓冲液：187.5 mM Tris-HCl (pH 6.8 25 °C), 6% w/v SDS, 30% 甘油, 150 mM DTT, 0.03% w/v 溴酚蓝。细胞裂解样品制备1. 吸去培养基。加入含调控因子的新鲜培养基，处理所需的时间。2. 在非变性条件下收集细胞，弃去培养
或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心（3000 rpm，5 min）收集 Agarose 珠子，弃掉上清，用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。（小心吸取上清，避免触碰底部珠子） 收集沉淀，加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀，轻混均匀后煮沸 5 min，12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管，进行 Western 检测。
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