铅黄肠球菌荧光定量PCR试剂盒(染料法)

第七条：如何对染料法 PCR 引物进行设计？

光染料可以作为你初步的选择对象。老实说，荧光染料法实质上无非就是常规的PCR反应中添加了荧光染料，借助染料和双链DNA的结合所发出的荧光实时监控反应的进程。由于不需要设计序列特异性探针和优化反应条件，价格低廉，通用性强，而且荧光染料法可用于任何一种型号的定量PCR仪，因而同样得到广泛采用。荧光染料法的专一性和PCR没有本质的区别---但是作为“失之毫厘，谬之千里”高度精确的实验，你依然可以选择更好的荧光染料、更严谨专一的PCR酶、更好的缓冲体系来提高反应的可靠程度。 在荧光染料法的定量PCR反应试剂中

肠球菌属的鉴定

（-）、部分有稀疏鞭毛（铅黄肠球菌），Lancefield D 群：大多数菌株产生一种与细胞壁有关的甘油磷壁酸抗原，该抗原被确认为链球菌D 群抗原（80%），适宜温度35-37℃ 大多数细菌在10℃ 和45℃ 生长。 （二）菌落特征BA：灰白色、不透明、表面光滑、直径0.5-1 mm、α-、不溶血、少数β-中国蓝/伊红亚甲蓝/麦康凯/SS：可生长，但菌落较小，发酵乳糖的菌株可形成蓝色或粉红色小菌落。液体培养基：均匀浑浊生长。 （三）生化反应PYR(+) 盲肠肠球菌、哥伦比亚内肠球菌、解糖肠球菌例外LAP

「谁」动了我的扩增曲线？

了我的扩增曲线呢？ 其实，这种现象并不是偶发的，有很多原因可能导致，并且有个专属名称「Hook Effect」，翻译过来叫「鱼钩效应」。「鱼钩效应」指在荧光定量 PCR 过程中，DNA 扩增到指数增长期后出现的一种荧光信号不能保持稳定（或者上升）而出现下降的现象 [1]。 导致扩增曲线出现这一现象的因素比较复杂，这里我们分别从嵌入性染料法与探针法两种定量方式的角度为大家解释： 嵌入性染料法： 嵌入性染料法（例如 SYBR Green I）产生「鱼钩效应」主要是由于模板序列混杂，在 PCR