自诱导培养基(lac启动子)北京厂家

特别提示：包括自诱导培养基(lac启动子)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：自诱导培养基(lac启动子)
英文名称：Auto-induction Medium
产品货号：BTN100825
产品规格：200mL

本产品是本产品是在pET 专用生长培养基的基础上开发而成的，它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制，实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。

产品特点：
1．本产品自动诱导表达，不需要添加任何IPTG或相关诱导物，节约成本。
2．免去了密切监控菌液密度的过程，尤其适合大规模筛选。
3．极大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
4．极大提高外源蛋白的表达量，最高可占细菌总蛋白的45%。
5．与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
6．本产品即开即用，非常方便。
7．适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统，如pET系列。
8．不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。

产品组成：

成分	规格
成分A	200ml
成分B	1.25ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

使用方法：

一、培养基的配制
1．配制自诱导培养基：将1.25mL溶液B全部加入到200mL的溶液A中即得自诱导培养基。
 注意：必须严格无菌操作，否则自诱导培养基非常容易长细菌。
2．贴好标签待用。如果长期时间不用，可以冻存在-20℃。

二、培养基的使用
1．将构建好的质粒转化入细菌，如BL21(DE3)，涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素)，37℃培养过夜。
2．挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中，37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。
3．将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是100mL，则加入100μl菌液)，同时加入适当的抗菌素。注意：在自诱导培养基中，如果使用卡拉霉素，其终浓度比一般的培养基高，需要100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大，故需要大量氧气，因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皱褶式的，这样摇晃中氧气供应更充分。
4．37℃培养过夜，或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
5．收集菌液开始蛋白纯化步骤。

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