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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
34
- 英文名:
MC1061F- 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*50
产品名称:MC1061F- 感受态细胞100ul*50
规格:100ul*50
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
MC1061F- 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
MC1061F- 感受态细胞100ul*50注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
MC1061F- 感受态细胞100ul*50操作说明:
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
NLGN3 Others Human 人 Neuroligin-3 / NLGN3 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙基三苯基化鏻(>98.0%(HPLC)(T))Ethyltriphenylphosphonium Iodide质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
中国仓鼠肺细胞;CHL1-己基-2,3-二甲基咪唑啉化物(>98.0%(HPLC)(T))1-Hexyl-2,3-dimethylimidazolium Iodide质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
PDGFRB Others Rat 大鼠 PDGFRB / PDGFR-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 异丙基三苯基化膦(>98.0%(HPLC)(T))Isopropyltriphenylphosphonium Iodide质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
人淋巴血管内皮细胞完全培养基 100mL甲基三苯基化1(>98.0%(T))Methyltriphenylphosphonium Iodide质量规格:>98.0%(T)
SMC-1细胞,人胸膜瘤细胞 鼠伤寒沙门氏菌Ta98 大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E1-甲基-3-丙基化咪唑鎓(>95.0%(HPLC)(T))1-Methyl-3-propylimidazolium Iodide质量规格:>95.0%(HPLC)(T)
PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人细胞裂解液 (阳性对照) 布比卡因碱,丁吡卡因Bupivacaine base质量规格:>98%
人急性单核细胞白血病细胞;THP-1布比卡因(标准品)Bupivacaine base质量规格:HPLC>98%,标准品
PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 马来酸桂哌齐特Cinepazide maleate质量规格:>99%
CL-0453TE-10(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×2马来酸桂哌齐特(标准品)Cinepazide maleate质量规格:含量测定
小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) NRRL 2543[LSHTM BB325]细胞 HFL-I(MEMα)(胚肺成纤维细胞)磺胺嘧啶钠Sodium sulfadiazine(SD-Na)质量规格:>98%,BR
胰酶(1:4500) Pancreatin 质量规格:酶活1:4500,BR 人促甲状腺素受体(TSHR)抗体免疫试剂盒 Human TSHR aibody ELISA Kit
枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君 Orphenadrine citrate 质量规格:>98%,BR 人促甲状腺素受体(TSHR)免疫试剂盒 Human TSHR ELISA Kit
β-半乳糖苷酶 β-Galactosidase 质量规格:700u/mg,罗氏分装 人促卵泡素(FSH)免疫试剂盒 human follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
脱落酸(标准品) Abscisic acid,S-ABA 质量规格:98%,标准品 人促凝素(CP)免疫试剂盒 Human Cancer Procoagula,CP ELISA Kit
脱落酸(高) Abscisic acid,S-ABA 质量规格:98%,BR 人促肾上皮质激素释放激素(CRH)免疫试剂盒 human coicoopin releasing hormone,CRH ELISA Kit
脱落酸,S-诱抗素; 壮芽灵 Abscisic acid,S-ABA 质量规格:95%,BR 人促肾上腺皮质激素(ACTH)免疫试剂盒 Human adrenocoicoopic hormone,ACTH ELISA kit
胃蛋白酶(1:3000) PEPSIN 质量规格:1:3000,BR 人促生长激素释放激素(GHRH)免疫试剂盒 Human growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit
核糖核酸酶A(sigma) Ribonuclease A from bovine pancreas 质量规格:≥50 U/mg,sigma 原装 人促睡眠肽(DSIP)ELISA检测试剂盒Humandeltasleep-inducingpeptide,DSIPELISAKit 96T/48T
S-4 Andarine 质量规格:>98% 人促睡眠肽(DSIP)免疫试剂盒 Human delta sleep-inducing peptide,DSIP ELISA Kit
胃蛋白酶(1:12000) PEPSIN 质量规格:1:12000,BR 人促胃液素受体(GsaR)ELISA检测试剂盒Humangasieceptor,GsaRELISAKit 96T/48T
MC1061F- 感受态细胞100ul*50人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)免疫试剂盒 Human MAPKAPK3 ELISA Kit 木瓜蛋白酶(800u/mg) Papain 质量规格:800u/mg
人促甲状腺素(TSH)免疫试剂盒 Human Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit 木瓜蛋白酶(2000u/mg) Papain 质量规格:2000u/mg;200万u/g
人促甲状腺素释放激素(H)免疫试剂盒 Human thyroopin-releasing hormone,H ELISA KIT 胰酶(1:2500) Pancreatin 质量规格:酶活1:2500,BR
人促甲状腺素受体(TSHR)抗体免疫试剂盒 Human TSHR aibody ELISA Kit 胰酶(1:4500) Pancreatin 质量规格:酶活1:4500,BR
人促甲状腺素受体(TSHR)免疫试剂盒 Human TSHR ELISA Kit 枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君 Orphenadrine citrate 质量规格:>98%,BR
人促卵泡素(FSH)免疫试剂盒 human follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit β-半乳糖苷酶 β-Galactosidase 质量规格:700u/mg,罗氏分装
人促凝素(CP)免疫试剂盒 Human Cancer Procoagula,CP ELISA Kit 脱落酸(标准品) Abscisic acid,S-ABA 质量规格:98%,标准品
人促肾上皮质激素释放激素(CRH)免疫试剂盒 human coicoopin releasing hormone,CRH ELISA Kit 脱落酸(高) Abscisic acid,S-ABA 质量规格:98%,BR
人促肾上腺皮质激素(ACTH)免疫试剂盒 Human adrenocoicoopic hormone,ACTH ELISA kit 脱落酸,S-诱抗素; 壮芽灵 Abscisic acid,S-ABA 质量规格:95%,BR
人促生长激素释放激素(GHRH)免疫试剂盒 Human growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit 胃蛋白酶(1:3000) PEPSIN 质量规格:1:3000,BR
规格:100ul*50
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
MC1061F- 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
MC1061F- 感受态细胞100ul*50注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
MC1061F- 感受态细胞100ul*50操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
NLGN3 Others Human 人 Neuroligin-3 / NLGN3 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙基三苯基化鏻(>98.0%(HPLC)(T))Ethyltriphenylphosphonium Iodide质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
中国仓鼠肺细胞;CHL1-己基-2,3-二甲基咪唑啉化物(>98.0%(HPLC)(T))1-Hexyl-2,3-dimethylimidazolium Iodide质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
PDGFRB Others Rat 大鼠 PDGFRB / PDGFR-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 异丙基三苯基化膦(>98.0%(HPLC)(T))Isopropyltriphenylphosphonium Iodide质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
人淋巴血管内皮细胞完全培养基 100mL甲基三苯基化1(>98.0%(T))Methyltriphenylphosphonium Iodide质量规格:>98.0%(T)
SMC-1细胞,人胸膜瘤细胞 鼠伤寒沙门氏菌Ta98 大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E1-甲基-3-丙基化咪唑鎓(>95.0%(HPLC)(T))1-Methyl-3-propylimidazolium Iodide质量规格:>95.0%(HPLC)(T)
PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人细胞裂解液 (阳性对照) 布比卡因碱,丁吡卡因Bupivacaine base质量规格:>98%
人急性单核细胞白血病细胞;THP-1布比卡因(标准品)Bupivacaine base质量规格:HPLC>98%,标准品
PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 马来酸桂哌齐特Cinepazide maleate质量规格:>99%
CL-0453TE-10(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×2马来酸桂哌齐特(标准品)Cinepazide maleate质量规格:含量测定
小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) NRRL 2543[LSHTM BB325]细胞 HFL-I(MEMα)(胚肺成纤维细胞)磺胺嘧啶钠Sodium sulfadiazine(SD-Na)质量规格:>98%,BR
胰酶(1:4500) Pancreatin 质量规格:酶活1:4500,BR 人促甲状腺素受体(TSHR)抗体免疫试剂盒 Human TSHR aibody ELISA Kit
枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君 Orphenadrine citrate 质量规格:>98%,BR 人促甲状腺素受体(TSHR)免疫试剂盒 Human TSHR ELISA Kit
β-半乳糖苷酶 β-Galactosidase 质量规格:700u/mg,罗氏分装 人促卵泡素(FSH)免疫试剂盒 human follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
脱落酸(标准品) Abscisic acid,S-ABA 质量规格:98%,标准品 人促凝素(CP)免疫试剂盒 Human Cancer Procoagula,CP ELISA Kit
脱落酸(高) Abscisic acid,S-ABA 质量规格:98%,BR 人促肾上皮质激素释放激素(CRH)免疫试剂盒 human coicoopin releasing hormone,CRH ELISA Kit
脱落酸,S-诱抗素; 壮芽灵 Abscisic acid,S-ABA 质量规格:95%,BR 人促肾上腺皮质激素(ACTH)免疫试剂盒 Human adrenocoicoopic hormone,ACTH ELISA kit
胃蛋白酶(1:3000) PEPSIN 质量规格:1:3000,BR 人促生长激素释放激素(GHRH)免疫试剂盒 Human growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit
核糖核酸酶A(sigma) Ribonuclease A from bovine pancreas 质量规格:≥50 U/mg,sigma 原装 人促睡眠肽(DSIP)ELISA检测试剂盒Humandeltasleep-inducingpeptide,DSIPELISAKit 96T/48T
S-4 Andarine 质量规格:>98% 人促睡眠肽(DSIP)免疫试剂盒 Human delta sleep-inducing peptide,DSIP ELISA Kit
胃蛋白酶(1:12000) PEPSIN 质量规格:1:12000,BR 人促胃液素受体(GsaR)ELISA检测试剂盒Humangasieceptor,GsaRELISAKit 96T/48T
MC1061F- 感受态细胞100ul*50人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)免疫试剂盒 Human MAPKAPK3 ELISA Kit 木瓜蛋白酶(800u/mg) Papain 质量规格:800u/mg
人促甲状腺素(TSH)免疫试剂盒 Human Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit 木瓜蛋白酶(2000u/mg) Papain 质量规格:2000u/mg;200万u/g
人促甲状腺素释放激素(H)免疫试剂盒 Human thyroopin-releasing hormone,H ELISA KIT 胰酶(1:2500) Pancreatin 质量规格:酶活1:2500,BR
人促甲状腺素受体(TSHR)抗体免疫试剂盒 Human TSHR aibody ELISA Kit 胰酶(1:4500) Pancreatin 质量规格:酶活1:4500,BR
人促甲状腺素受体(TSHR)免疫试剂盒 Human TSHR ELISA Kit 枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君 Orphenadrine citrate 质量规格:>98%,BR
人促卵泡素(FSH)免疫试剂盒 human follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit β-半乳糖苷酶 β-Galactosidase 质量规格:700u/mg,罗氏分装
人促凝素(CP)免疫试剂盒 Human Cancer Procoagula,CP ELISA Kit 脱落酸(标准品) Abscisic acid,S-ABA 质量规格:98%,标准品
人促肾上皮质激素释放激素(CRH)免疫试剂盒 human coicoopin releasing hormone,CRH ELISA Kit 脱落酸(高) Abscisic acid,S-ABA 质量规格:98%,BR
人促肾上腺皮质激素(ACTH)免疫试剂盒 Human adrenocoicoopic hormone,ACTH ELISA kit 脱落酸,S-诱抗素; 壮芽灵 Abscisic acid,S-ABA 质量规格:95%,BR
人促生长激素释放激素(GHRH)免疫试剂盒 Human growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit 胃蛋白酶(1:3000) PEPSIN 质量规格:1:3000,BR
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