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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
HUVEC
- 库存:
5021
- 细胞类型:
详询
- 品系:
详询
- 组织来源:
器官
- 相关疾病:
详询
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
详询
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 器官来源:
人
- 运输方式:
干冰
- 年限:
永久
- 生长状态:
良好
- 规格:
T25/冻存
细胞系使用说明书
| 细胞名称 |
HUVEC 人脐静脉内皮细胞 |
| 货号 |
H022 |
| 种属 |
人 |
| 细胞来源 |
ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
| 生长特性 |
贴壁 上皮样 |
| 培养条件 |
培养基:ENDOTHELIAL CELL MEDIUM(Sciencell,1001) 温度:37℃ 气相:95%空气,5% CO2 |
| 传代 |
1. 用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-2小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液; 2.待细胞长至80-90%时,需要对其进行传代,推荐传代比例为1:2至1:4 ; 3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心5min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。 |
| 保存 |
冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO (备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。) 保存条件:液氮存储 |
| 供应限制 |
仅供研究之用 |
| 常见问题及解决方案 |
1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为含新鲜培养基,不可使用瓶内旧培养基 3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。 |
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验人脐静脉内皮细胞( HUVEC )培养 1 ). 将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存。 (注:4℃下最多贮存24小时,室温下不超过6小时,否则废弃) 2 ). 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中,用无菌的PBS溶液冲洗3-5次,将污血冲洗干净为止。 3 ). 用手术钳夹紧脐带下端,加入15ml 的胶原酶(1mg/ml)室温下消化15-20分钟,并不时上下摇动脐带。 4 ). 消化完后,将下端手术钳松开
实验材料: 1. 婴儿脐带; 2. 不含Ca 2+ 和Mg 2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:M199培养液(含20%小牛血清);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:1,V:V)混合消化液;D-Hanks液、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素; 4. 培养器具:玻璃插管与输液胶管,培养瓶或皿、白内障、眼科剪、镊子等; 培养方法: 1.
的二抗50μl(异硫氰酸标记羊抗鼠IgG,北京),放入37℃2h后,用PBS洗涤3次。然后立即在荧光显微镜下观察,摄片。 血管内皮细胞鉴定结果: VWF相关抗原间接免疫荧光检查,原代及传代培养的内皮细胞浆中有黄绿色的荧光着色,胞核呈黑绿色,整个细胞轮廓清楚。作为对照的内皮细胞片子中,偶见绿色斑点散发荧光,未见细胞轮廓。 5.内皮细胞体外生长情况 用胰蛋白酶消化的人脐静脉内皮细胞,接种在24孔塑料培养板各孔内4h后,大部分细胞贴壁。早期细胞呈小多角、球形、呈团状,少数细胞伸展,48~72h
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