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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pDONR223-BRF2
- 库存:
100
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
2ug
pDONR223-BRF2/ pDONR223-BRF2质粒
pDONR223-BRF2 Plasmid
Catalog No. PVTB00803
Vector Backbone pDONR223
Backbone manufacturer Invitrogen
Vector type Gateway entry vector
Backbone size w/o insert 5005bp
Cloning site 5 N/A
Site destroyed during cloning N/A
Cloning site 3 N/A
Bacterial resistance Spectinomycin
Growth strain DH5alpha
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers None
Background Full length cDNA clone of Homo sapiens BRF2, RNA polymerase III transcription initiation factor subunit
Gene Information
Alternative Gene Name BRFU; TFIIIB50
Insert Gene name BRF2
Insert size 1260bp
Accessions BC010648
Tag None
Species Homo sapiens (human)
Gene ID 55290
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文献和实验库。 克隆资源因为已克隆到Gateway改造过的载体,所以可以快速地将基因转到各种表达系统中。 图4 进入Gateway系统的各种路线 * 目前的克隆资源带有attB位点,需要与pDONR质粒重组五、触手可及的最高级表达系统 一旦您构建好Gateway入门克隆,蛋白表达和分析的大门就会向您敞开。使用Gateway技术,您可以进入到几乎是无数种的表达系统。因为没有一个单一的表达系统蛋白适合于每一种蛋白,优化基因表达的最好方法是在多个系统中分析您的蛋白(图5)。 图5 在Gateway
是线性的,如果用质粒必须做酶切,但是事实证明用超螺旋的质粒结果没有区别。5. 同理,用引物在目的基因上下游加入AttL序列后直接进行LR反应也是可行的,可以省去BP反应相关的材料和费用。但是pDONR系列载体自有其优点(载体小,拷贝数高,卡那霉素抗性,容易测序),所以要按实际情况权衡6. 慢病毒载体的空白质粒有大量的重复序列,久存会导致LR反应成功但是转化后抽不出质粒的情况,需要注意。
也夹着一个ccdB自杀基因。当需要将目的基因从入门载体(Entry Vector)转移到目的载体(Destination Vector)时,只要将两种质粒混合(线性化能有效提高重组率),加入含有Int、IHF、Xis等重组因子的LR重组酶混合物,attR2序列和attL2序列发生重组,生成一个融合质粒。attL1序列再和attR1序列重组,融合质粒分解为两个新的质粒,目的基因与原来位于目的载体上的自杀基因发生重组置换,得到一个带目的基因的目的载体(生成新的重组位点attB1、B2)和带自杀
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