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- 柯雷生物
- X0672
- 2025年07月13日
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- 技术资料
- 库存：
100
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
5×105cells/T25培养瓶
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文献和实验实验材料：1. 动物胎体胃黏膜，胃溃疡或胃癌手术切除的正常胃黏膜组织2. 1%Ⅳ胶原蛋白或1%明胶铺培养瓶，4℃冰箱内过夜，使用前在37℃培养箱内放置2h，然后用培养液浸洗1次。3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.44. 250000U/LⅠ型胶原酶或125000U/LⅠ型胶原酶和0.5%透明质酸酶，DMEM配置5. 解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊6. 离心管（15ml、50
胎鼠，放入70%乙醇中消毒1min。经腹正中切口取出小肠，放入预冷的PBS中。 2. 用PBS冲洗后，剪除肠系膜。纵行剪开肠壁，用PBS冲洗3次，洗去粘液。 3. 将肠壁剪成1mm3 左右的小块的组织块，放入20ml消化液中，37℃水浴中振荡消化30min。 4. 用吸管反复吹打组织块3-5min，然后以1000r/min，离心5min。吸去消化液后，加入PBS，反复吹打，悬浮沉淀的肠绒毛组织。在相差显微镜下观察可见单个黏膜上皮细胞或隐窝细胞团。 5. 将消化下来的细胞
2-3次，将黏膜剪成约1mm3 大小的组织块。 2. 将植块放入培养皿中，上皮面朝下；也可在培养皿内放入盖玻片，将组织块放在盖玻片上培养。 3. 当组织块贴壁后，加入适量培养液，培养液的量为能湿润组织块但不使组织块浮起为宜，在37℃、5%CO2 培养箱内静置培养。 4. 组织块贴壁1-3d后，补充培养液。以后每隔2-3d换液1次。 5. 植块培养3d后，细胞从植块边缘迁出。1周后，细胞向外迁移扩展，并逐渐分化，细胞的形态逐渐趋向正常食管黏膜上皮细胞
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