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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pLV hU6-sgRNA hUbC-dCas9-KRAB-T2a-GFP
- 库存:
10
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
质粒干粉
pLV hU6-sgRNA hUbC-dCas9-KRAB-T2a-GFP
PVT10972? ? ? ? ?2ug
pLV hU6-sgRNA hUbC-dCas9-KRAB-T2a-GFP Description
pLV hU6-sgRNA hUbC-dCas9-KRAB-T2a-GFP is a Mammal Editing plasmid.
?
pLV hU6-sgRNA hUbC-dCas9-KRAB-T2a-GFP Information
Resistance Amp
Strain Stbl3
Culture temperature 37閳?/p>?
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文献和实验的表达质粒。A)PCR 扩增的方法U6:来源于人 U6 小核启动子,常用小 RNA 表达,转录本为 shRNA。将 sgRNA 放到 U6 后面,利用 U6 的启动来扩增 sgRNA。将这部分内容整合到 Cas9 expression plasmid pSpCas9(Cas9 表达质粒)中,一起共转。B)sgRNA 表达质粒的方法现在我要用这个方法来举例设计 p53 引物找到包括 sgRNA 序列的前后 1000 个碱基的序列(2000 bp)找到的序列如下:将上面复制的序列粘贴到 blast 中
reaction. Mix the same reagents without addingthe sgRNA oligo duplex to prepare a negative control reaction. Incubate the ligation reaction in a thermocycler followingthe parameters below. 3. (Optional but highly recommended) Plasmid-Safe
对于每一个进入生物领域的人,基本都避免不了分子克隆(认知的同胞除外),当然就需要一个称手的 DNA 比对软件。今天给大家强烈推荐一款 DNA 比对软件,APE(a plasmid editor)。这款软件不仅能做 DNA 序列比对,DNA 序列翻译,还能够做引物设计,酶切位点设计,质粒图谱构建(这个还是 snapgene 更好用,不过人家是收费的),ORF 查找等非常多的实用功能,下面我来详细介绍一下这几个常用的功能。先发个软件的链接,需要的小伙伴可以去下载使用☟http
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