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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pLVX-AcGFP1-N1-Beclin 1
- 库存:
100
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
2ug
pLVX-AcGFP1-N1-Beclin 1 Plasmid
Catalog No. PVTB70007-4b
Vector Backbone pLVX-AcGFP1-N1
Backbone manufacturer Clontech
Vector type Mammalian Expression, Lentiviral
Backbone size w/o insert 8834bp
Cloning site 5 EcoR I
Site destroyed during cloning NO
Cloning site 3 BamH I
Bacterial resistance Ampicillin
Growth strain Stbl3
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers Puromycin
Background Lentiviral expression vector of Rattus norvegicus beclin 1, fused with the AcGFP1 protein at the C-terminus
Gene Information
Alternative Gene Name Becn1
Insert Gene name Beclin 1
Insert size 1347bp
Accessions BC074011
Tag AcGFP1(C-term)
Species Rattus norvegicus (Norway rat)
Gene ID 114558
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文献和实验PYM30 ECGP PYM33 EBFP PYM39 EYFP pLVX-ShRNA1 pLVX-puro PLVX-ires-zsgreen1 PLVX-acgfp-n1 PLVX-dsred-monomer-n1
1、质粒的概念 质粒(Plasmid)是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子,能够独立于宿主染色体进行自我复制,并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因(如抗生素抗性基因)。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型,如用于保存序列信息的克隆质粒(如:pUC 系列质粒),用于表达蛋白的质粒(如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒),用于基因编辑的质粒(如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
) 克隆困难怎么办? 对于大片段载体构建实验而言,难点在于片段扩增效率低、重组 / 连接困难、质粒稳定性差、容易发生断裂等。需针对这些痛点,从技术路线选择、实验细节优化两方面制定策略,具体方案如下: ①建议首先选择「分段克隆 + 拼接」 策略,降低连接难度; ②大片段克隆的关键在于长片段的扩增,所以需要从源头保证实验成功率,即保证模板完整度,在扩增前确保模板未发生降解;其次优化 PCR 体系,比如选择长片段专用 PCR 酶,通过梯度测试选择最佳模板上样量及退火温度等; ③避免高拷贝载体(如 pUC
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