- ￥1230
- LSM Bio
- 进口
- PVTB01158-2a
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20摄氏度
- 保质期：
3个月
- 英文名：
pBMP-TA-luc
- 库存：
100
- 供应商：
LSMBIO
- 规格：
2ug
pBMP-TA-luc Plasmid
Catalog No. PVTB01158-2a
Vector Backbone pGL4.19-TA
Backbone manufacturer Promega
Vector type Luciferase reporter vector
Backbone size w/o insert 5788bp
Cloning site 5 Kpn I
Site destroyed during cloning NO
Cloning site 3 Xho I
Bacterial resistance Ampicillin
Growth strain Top10
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers Neomycin
Background Mammalian Luciferase Reporter vector of Homo sapiens BMP response element v1
Gene Information
Alternative Gene Name N/A
Insert Gene name BMP(v1) response element
Insert size 44bp
Accessions
Tag None
Species Homo sapiens (human)
Gene ID N/A
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文献和实验superskyfly 我自己都觉得我自己很牛，千百人都做出来的试验，我就是做不出来。质粒用的是Promega p4.32-NF-kB-Luc, 转染用的是Invitrogen的Lipofactamin, 激活用的是Sigma生产的PMA和PHA-P,Assay用的是Promega dual,结果加了PMA和PHA的和不加的读数几乎没有区别。加了compound的和不加的也没有区别。 用过PC3, Jurkat, A549，HCT116都是一样。
tianjiaoya 我想构建一个真核表达质粒，用这个真核表达质粒来表达绿色荧光蛋白，但是我想让绿色荧光蛋白的表达受酵母菌GLA4转录因子的调控，也就是说有GLA4存在，这个质粒就表达绿色荧光蛋白，没有GLA4存在，就不表达绿色荧光蛋白。当然需要对真核表达质粒上的启动子做相应的调整，但是我现在的问题是，转录因子GLA4能不能对质粒上有相应调控元件的表达盒，进行调控？据说GLA4上有核定位元件，要是将这个核定位序列删除，可行吗？据说核内有很多的辅助因子，参与了蛋白
含有这两种酶切位点序列。 已经开始进行ta克隆 如楼上战友所述，TA克隆的确是长片段亚克隆的好的手段。我最初开始学习构建质粒的时候也是先上TA，不过我们实验室一直使用一种KAPA HIFI readymix的酶，效果很好，保真性也非常非常高，就是做TA的时候比较麻烦，需要把PCR产物纯化回收后再加一次A tail，而就是这一步我感觉一直没有摸索到最优化稳定的条件，所以每次加A后连pCR2.1 转化的结果都不稳定，有时候长的多有时候长得少，之前曾经就这个问题发帖
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