- ￥1230
- LSM Bio
- 进口
- PVTB00621-1a
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20摄氏度
- 保质期：
3个月
- 英文名：
pET28a-PKM2(FL)
- 库存：
100
- 供应商：
LSMBIO
- 规格：
2ug
pET28a-PKM2(FL) Plasmid
Catalog No. PVTB00621-1a
Vector Backbone pET-28a(+)
Backbone manufacturer Novagen
Vector type E. coli Expression
Backbone size w/o insert 5369bp
Cloning site 5 EcoR I
Site destroyed during cloning NO
Cloning site 3 Xho I
Bacterial resistance Kanamycin
Growth strain Top10
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy Low Copy
Selectable markers None
Background E. coli Expression vector of Homo sapiens pyruvate kinase, muscle with N terminal 6xHis tag
Gene Information
Alternative Gene Name CTHBP;MGC3932;OIP3;PK3;PKM;TCB;THBP1
Insert Gene name PKM2(FL)
Insert size 1596bp
Accessions BC007640.1
Tag His(N-term)
Species Homo sapiens (human)
Gene ID 5315
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文献和实验pET26b 大肠杆菌质粒 Kan pET27b 大肠杆菌质粒 Kan pET28a 大肠杆菌质粒 Kan pET28a+SUMO 大肠杆菌质粒 Kan
b PET26b PET27b PET28a PET28b PET29a PET30a PET31b PET32a PET35b PET37b
1 和 xho1 进行双酶切，回收后产物与载体酶切回收产物连接即可。 重组法对于重组法，首先设计引物将目的基因 PCR 出来，即同源臂加基因引物，此时应注意，同源臂应包含酶切位点，同样以 PKM2 基因为例。其上下游引物分别为：设计好引物后，通过 PCR 方法扩增目的基因，胶回收后的产物与载体酶切回收产物重组即可。3. 转化，涂板，挑单克隆，测序。4. 质粒构建成功后即可转染观察是否能在细胞中表达。以上就是通过慢病毒包装体系在细胞中过表达基因的方法，此外还应注意几点：1. 在构建质粒时，最好可以加入 GFP
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