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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pcDNA3.1-myc-His-nNOS(T119A)
- 库存:
100
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
2ug
pcDNA3.1-myc-His-nNOS(T119A) Plasmid
Catalog No. PVTB00618-2a
Vector Backbone pcDNA3.1-myc-His
Backbone manufacturer Invitrogen
Vector type Mammalian Expression
Backbone size w/o insert 5500bp
Cloning site 5 N/A
Site destroyed during cloning N/A
Cloning site 3 N/A
Bacterial resistance Ampicillin
Growth strain Top10
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers Neomycin
Background Mammalian Expression vector of Homo sapiens nitric oxide synthase 1(one point mutation T119A) with C terminal Myc and 6xHis tag
Gene Information
Alternative Gene Name bNOS;NOS1
Insert Gene name nNOS(T119A)
Insert size 4392bp
Accessions NM_052799.1
Tag Myc(C-term);His(C-term)
Species Homo sapiens (human)
Gene ID 24598
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文献和实验相关专题 那些实验室常用的克隆载体 pUC质粒载体是重要的大肠杆菌质粒载体之一,一起看下pUCm-T质粒图谱 和序列吧。 pUCm-T质粒图谱 pUCm-T载体 序列
系列):高拷贝会导致大片段质粒复制压力大,易丢失或断裂,优先用低拷贝载体(如 pACYC184,拷贝数 10-15)或大片段专用载体(如 BAC 载体 pBeloBAC11,可容纳 100kb 以上片段,在大肠杆菌中稳定存在); ④选择合适的连接方法,比如 Gibson 组装(无缝克隆)的方法更适合 10-20kb 大片段的连接,相比传统的 T4 连接的方法,成功率更高,操作更简便; ⑤选择重组缺陷型感受态,提高大质粒的转化效率,如 Stbl3、DH10B 等,此外转化方式也会影响转化
.在一 块胶上同时设分子量标记、空质粒等对照,就可以看出载体中是否有插入片段以及插入片段的大小.酶切鉴定是克隆鉴定的第一步.如果酶切电泳条带与设计相符, 可以初步确定目的基因插入了 载体 ,下一步就是进行测序鉴定. 2、PCR鉴定 现在很多载体克隆位点两侧存在恒定的序列,例如 T 7 和 SP 6 启动子 ,针对这种序列的 PCR 引物 可以很方便地从专业公司购买或者合成.有时插入基因本身就是 PCR 产物,实验室已有
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