- ￥930
- LSM Bio
- 进口
- PVT6316
- 2025年08月05日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20摄氏度
- 保质期：
3个月
- 英文名：
lentiGuide- Puro
- 库存：
100
- 供应商：
LSMBIO
- 规格：
2ug
lentiGuide-Puro
Search name
lentiGuide-Puro,Plasmid lentiGuide-Puro,lentiGuide-Puro vector
Bacterial Resistance:Ampicillin
Growth Strain:
Use:CRISPR-CAS25-sgRNA plasmid
lentiGuide-Puro plasmid information
Vector backbone Custom
Backbone size w/o insert (bp) 9482
Vector type Mammalian Expression, Lentiviral, CRISPR
Selectable markers Puromycin
Gene/Insert name S. pyogenes sgRNA cassette
Alt name S. pyogenes CRISPR customizable RNA element
Species Synthetic
Insert Size (bp) 100
Promoter hU6
Bacterial Resistance(s) Ampicillin
Growth Temperature 37°C
Growth Strain(s) Stbl3
Growth instructions Use SapI digest to check for unwanted recombination of lentiviral plasmid. Only amplify in RecA- bacteria (eg. Stbl3).
Copy number High Copy
Cloning method Restriction Enzyme
5′ cloning site BsmBI (not destroyed)
3′ cloning site BsmBI (not destroyed)
5′ sequencing primer hU6-F
3′ sequencing primer hGata4-rev (5'-ATTGTGGATGAATACTGCC-3')
Gene/Insert name Puromycin resistance
Alt name puromycin N-acetyl-transferase
Alt name PAC
Insert Size (bp) 600
Promoter Ef1-a
Cloning method Restriction Enzyme
5′ cloning site BsiWI (not destroyed)
3′ cloning site MluI (not destroyed)
5′ sequencing primer EF-1a-F
3′ sequencing primer WPRE-R
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文献和实验型质粒 （3）必需具备一个以上的酶切位点，有选择的余地； （4）必需有易检测的标记，多是抗生素的抗性基因，不特指多位 Ampr（试一试）。 （5）满足自己的实验需求，是否需要包装病毒，是否需要加入荧光标记，是否需要加入标签蛋白，是否需要真核抗性（如Puro、G418）等等。 无论选用哪种载体，首先都要获得载体分子，然后采用适当的限制酶将载体 DNA 进行切割，获得线性载体分子，以便于与目的基因片段进行连接。 如何阅读质粒图谱 第一步：首先看 Ori 的位置，了解质粒的类型（原核/真核
表达都要根据载体的说明选择相应抗生素，不是可以随便用的。做细胞表达时，如果只是要求短时表达（即所谓瞬时转染），可不必用细胞抗生素。丁香园网友mikke_2000认为：应该是质粒转染细胞，筛选出稳定表达新基因的细胞系吧。筛选所选用的抗生素是跟你转染所用的质粒上所带的真核筛选抗性基因有关的。最常见的载体上带有新霉素抗性基因neo，所以筛选的时候用G418，如果带有嘌呤霉素的抗性基因就要选用puro。另外如果双转染，要考虑到两种质粒的筛选抗性的兼容。G418等的筛选浓度最好也用预试验摸一下~~
EGFP 荧光表达。 检测结果显示靶点一和靶点二均有效果，靶点一的效果优于靶点二。 TP53 基因敲除 293T 细胞筛选 实验步骤 1) 转染前 24 小时将 293T 铺到 6 孔板中。 2) 按照下列体系制备质粒稀释液 pCas9/gRNA1-P531 0.7ug pLV-EGFP（2A）puro 0.1ug DMEM 培养基 X ul 总体积 50ul 3) 准备转染
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