- ¥400 - 880
- Signalway Antibody
- pa002
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
一年
- 保存条件：
染色液2-8℃保存。蛋白标准-20℃保存。
- 规格：
250T/100T
| 规格： | 250T | 产品价格： | ¥400.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100T | 产品价格： | ¥880.0 |
Bradford法（考马斯亮蓝法），是目前灵敏度最高的蛋白质测定法之一。当Bradford 染色液（考马斯亮蓝G250）和蛋白在酸性条件下结合时，溶液颜色由棕黑色转为蓝色，最大吸光值波长由456nm 转至595nm，吸光值与蛋白质的含量在一定浓度范围内有较好的线性关系，通过测定吸光值大小并对照标准蛋白的吸光值，推算出蛋白浓度，实现了蛋白浓度测定的快速，稳定和高灵敏度。
Bradford 染色液为2 倍浓缩母液，便于储存。
使用方法：
A． 96 孔酶标板测定：
1. 蛋白标准工作液配制：根据样品数量配制相应体积的蛋白标准工作液。将蛋白标准储存液用双蒸水5 倍稀释，配成1mg/ml 的工作液。
2. 标准曲线绘制。取一块酶标板，按以下表格数据加入试剂：
| 孔号 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 蛋白标准（ul） | 0 | 1 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 |
| 去离子水（ul） | 100 | 99 | 98 | 96 | 94 | 92 | 90 |
| Bradford 2x 染色液（ul） | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 对应的蛋白含量（ug） | 0 | 1 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 |
3. 振荡混匀后，室温放置 5-10 分钟。
4. 用酶标仪测定 A595，以不含BSA 的光吸收值为空白对照。
5. 以蛋白含量（μg）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。
6. 样品测定：将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度，取10μl 样品，加入100μl 2x Bradford 染色液
和90μl 的去离子水，混匀后放置5-10 分钟，然后以0 号孔为对照，测定样品吸收值A595。
7. 根据测得的吸收值，在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。
8. 计算蛋白浓度：以查得的蛋白含量除以样品体积10μl，再乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。
B．比色皿测定
按照比色皿规格，与以上方法相同，适当按比例增加各溶液体积即可。
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文献和实验Bradford法蛋白定量（Bradford Protein Assay ）
Bradford Assay is a rapid and accurate method commonly used to determine the total protein concentration of a sample. The assay is based on the observation that the absorbance maximum for an acidic solution of Coomassie Brilliant Blue G-250
Bradford法蛋白定量（Bradford Protein Assay ）
Bradford Assay is a rapid and accurate method commonly used to determine the total protein concentration of a sample. The assay is based on the observation that the absorbance maximum for an acidic solution of Coomassie Brilliant Blue G-250
原理：这一方法基于考马斯亮蓝G-250有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下，可配成淡红色的溶液，当与蛋白质结合后，产生蓝色化合物，反应迅速而稳定。反应化合物在465－595nm处有最大的光吸收值，化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因此可检测595nm的光吸收值的大小计算蛋白的含量。 溶液： ①Bradford储存液 100ml95％乙醇 200ml88％磷酸 350mgServaG蓝 室温下长期保持稳定。 ②Bradford
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