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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
一年
- 保存条件:
2-8℃避光保存
- 规格:
500T/1000T
| 规格: | 500T | 产品价格: | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1000T | 产品价格: | ¥1480.0 |
- 需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
- 正式实验前,建议先做预实验摸索接种细菌的数量和加入Alamar Blue试剂后的培养时间。
产品简介:
细菌活性检测试剂盒是应用新型的氧化还原指示剂阿尔玛蓝快速高灵敏度检测细菌活性的比色检测产品。
AlamarBlue是一种氧化还原指示剂,能根据代谢活性产生吸光度变化和荧光信号。其在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性,而在还原状态下,转变为呈粉红或红色荧光的还原产物,其吸收峰为530-560nm,而散射峰为590nm。在细菌增殖过程中,体内NADPH/NADP、 FADH/FAD、 FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高,处于还原环境。摄入菌体内的染料被这些代谢中间体还原后释放到体外并溶于培养基中,使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。最后用普通分光光度计或荧光光度计进行检测,吸光度和荧光强度与活性细菌数成正比。这种染料经过验证安全无毒,用于细菌活性和细菌增殖的定量分析。AlamarBlue的无毒特性使细菌可长期暴露于这种染料,因此可随时间进行测量或进行终点测量。由于AlamarBlue对细菌无毒、无害,不影响细菌的合成与分泌等活性,因此可以对同一批细菌的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察,因此有操作简便和几乎不干扰细菌正常代谢的特点。
检测方法:
- 在 530-560 nm 激发,在 590 nm 发射荧光
- 在 570 nm 和 600 nm用分光光度计测定光吸收
产品特点:
● 使用方便:仅使用单一试剂;
● 对微生物细胞进行灵敏、无毒且安全的细胞活力和增殖测定;
● 能长期使用,持续进行测定而不损伤细菌或产生有毒废物;
● 灵活、简便- 能与多种仪器平台、96 和 384 孔板以及荧光或分光光度法测定兼容;
使用方法:
使用注意事项:
- 合适密度的细菌可以增加检测灵敏度。
- 注意接种细菌浓度和加入检测试剂后孵育时间。细菌浓度过高或孵育时间过长,会导致继发性还原反应,产生无色和荧光消失。
- 孵育时,须避光。
- 本产品可以使用荧光或分光光度检测,但荧光的灵敏度高,实验误差小,推荐使用荧光检测。
细菌的活性实验,一般可在96孔细胞培养板中进行,下面以96孔板检测为例,如果使用其他培养方法,AlamarBlue试剂加入培养液用量的10%即可。
- 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定。
- 接种的细胞按照实验需要,送入培养箱进行培养。
- 培养结束后,取出AlamarBlue试剂,置室温融化混匀,于洁净工作台内按10微升/孔加入微孔板中,在培养箱内继续孵育12-24小时,培养液颜色由蓝变为粉红(如采用荧光分光光度法,只需孵育2-8小时);
- 在570nm测定吸光度,参考波长600nm。如无此滤光片, 可用565 nm 和 610 nm的滤光片替代.
- 也可用荧光分光光度法检测,激发光波长在530-560 nm之间,发射光波长为590 nm。检测时间可在结果以荧光强度表示。
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文献和实验cellulase活性的检测方法很多,包括: 1.棉线切断法; 采用Monod 恒温振荡器,将缝纫机线(15 支纱) 的一端浸入含有5 ml 酶液的试管中, pH 5. 0 ,40 ℃,72 r·min - 1振荡测定纱线切断所需时间,以此来得到酶活力。 2.滤纸崩溃法 采用Monod 恒温振荡器,将两片滤纸(1 ×1 cm) 加入装有5 ml 酶液试管中,40 ℃,72 r·min - 1 ,pH 4. 0 。计算滤纸完全崩溃所需要的时间,求得酶活力。
【求助】核转录因子活性检测试剂盒TransAM p65: 是不是一定要做标准曲线啊
tasthma 请问有没有那位战友用过activ motif 公司的核转录因子活性检测试剂盒TransAM p65啊?我想请教一下,是不是一定要做标准曲线啊? zhujoker 这种试剂盒一般都是需要做标准曲线的。 tasthma 谢谢版主!那我还得买他们的标准蛋白才行啊 zhuqueleee 没有必要的。 我当时用的就是这个试剂盒,因为到最后数值
问:如何检测几丁质酶的活性?在一篇文章里看到过,是利用这个酶来酶解底物来测量的。我的问题是:1、在测量该酶活性时,要不要把这个酶提取出来?2、它的底物时chitin,底物溶液怎么配制?答:1、对几丁质酶酶活的检测一般不需要把几丁质酶提取出来,但最好能适当的浓缩一下酶溶液,因为几丁质酶的活性不是很高。2、几丁质酶活检测的底物一般用胶状几丁质,浓度为0.5-1.0%,一般用PH5.0左右的醋酸缓冲液配制。胶状几丁质的制备方法如下:先用浓盐酸把几丁质溶解,然后用乙醇进行4度沉淀过滤,然后用玻璃
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