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文献和实验。同一孔平均值,最高值和最低值之间的差值应该在±1.0%和±0.010OD范围内。读数范围在2.000到3.000Abs同一孔平均值,最高和最低值之间的差值应在±1.0%和±0.005OD值范围内。读数范围在3.000Abs以上时准确度不符合要求。仪器线性度:仪器的线性度可使用一种溶剂的稀释系列得到。如可在492nm处测量在0.1%TWEEN20中的橘黄色甲基的稀释系列。具体方法如下:在参考光密度计上测量被稀释的溶剂,画出OD值对已知浓度的点图,并画出通过这些点的最好的直线。将从系列稀释中测得的吸光
的灵敏度、清晰的背景 [ 15 ] ,而且和质谱兼容。 在过去的几年中,一些荧光染料被用来凝胶染色,它们被证明具有较高的灵敏度而且兼容质谱鉴定。这些染料包括商业化的如 Sypros 系列染料,也包括以钌红为主要成分的染料 [ 17~21 ] 。Sypr Ruby ( SR ) 具有与 CCB 相似的一些特征,它是一种发光的钌复合材料,可与蛋白非共价作用。由于染色过程中对氨基酸的修饰是可逆的,所以它与质谱可能会有较好的兼容性[ 17,19] 。另外,尽管 SR 染色饱和度低,但它具有更宽
免疫检测等都属于这类方法。 (2)抗原或抗体效价滴定的原理:当抗原抗体复合物形成多少不能反应抗原抗体反应强弱时,就不能以检测反应强度来对抗原或抗体进行定量。在实际工作中,把浓度低的反应成分(抗原或抗体)的浓度固定,把浓度高的另一种反应成分作一系列稀释。例如用人血清作抗原免疫3只家兔,比较3只家兔产生抗体的多少,即滴定3只兔血清抗体效价,可用双向琼脂扩散法来滴定,例如将抗体浓度固定,将抗原作不同的稀释度,分别将抗原或抗体滴入琼脂的相应小孔中,观察免疫兔血清与不同稀释度的抗原出现明显沉淀浅的抗原
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