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- 2025年07月14日
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文献和实验Invitrogen 性能卓越的系统整合了可以利用的最好的RT技术，包括SuperScript™ III RT和最新推出的Thermo-X™ RT。SuperScript™ III RT是M-MLV RT基因工程升级版本，减少了RNaseH活性，提供更高的热稳定性（1-3）。这种酶可以在高达55℃的情况下合成cDNA，比以前使用的反转录酶提供更高的特异性，更高的cDNA产量以及更多的全长产物。Thermo-X™ RT克隆自一种嗜热真细菌，提供高达70℃的热稳定
，从而节省了花费在筛选大量PCR产物上的时间。图一 示意GeneRacer™的工作原理。RNA样品经CIP和TAP处理，保证GeneRacer™寡聚RNA仅同全长转录本连接。然后使用SuperScriptⅡ逆转录酶对这些转录本逆转录，得到的cDNA做为PCR的模板。GeneRacer™寡聚RNA序列做为GeneRacer™ 5’引物结合位点，这样，只有具有全长5’末端的cDNA才会被扩增。使用GeneRacer™步骤及高保真度Platinum® Taq DNA聚合酶，就可以确保得到最高效的实验结果。敏感
性酶切引起的偏差· SuperScript™ II逆转录技术从初始的mRNA材料中得到全长cDNA的百分比很高。SuperScript™ II逆转录酶（RT）的Rnase H活性低，能极大减少第一链合成时RNA的降解。 · GateWay®技术，一种已经深入了解的位点特异性重组系统，介导了文库的构建过程。这使得您的cDNA片段转入到GateWay®供载体以构建整个文库。然后就可以通过GateWay®技术将DNA重组到各种各样的表达载体上。反应保持了原有的方向和开放阅读框，所以不需要多余
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