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文献和实验Question 1.What are the differences among RNase H, RNase A, RNase B and RNase C? 2.In your cDNA kits, RNase H is added in the second strand reaction to produce more nicked RNA as primers for DNA synthesis. In this repect
% ),这使得化学合成siRNA 的成本升高。体外转录制备长片断RNA 并不难,但是由于研究表明长片断的双链RNA (>29bps )在哺乳动物细胞中通常会引发抗病毒反应―― 一种非特异基因表达抑制,而目前体外转录往往无法制备小于29bp 的小分子siRNA s 。一个新的研究发现,用RNase III 降解长片断双链RNA 成为siRNA s 库也能够有效诱导特异的基因沉默,这样可以避免了筛选有效siRNA s 的漫长过程,从而快速,经济的实现特定基因表达的沉默。在线虫、果蝇和其他一些物种的RNA 干扰
RNase Protection Assay (Beverly Faulkner-Jones)
formamide in aliquots at -20oC1 10 x RNase protection buffer 400 mM PIPES (disodium piperazine-N,N'-bis[2-ethansulphonic acid]),10 mM EDTA and 4 M NaCl, pH 6.4. Add PIPES as the free acid (RMM 302, Boehringer 239 496) and adjust pH to 6.4 : the PIPES
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