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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
121
- 英文名:
Luciferase Reporter Gene Assay Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃避光
- 规格:
100T|500T|1000T
特别提示:包括萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒
英文名称:Luciferase Reporter Gene Assay Kit
产品货号:SY0058
产品规格:100T|500T|1000T
报告基因检测是现代分子生物学研究领域中分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件(如启动子、增强子和沉默子等)和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具。本萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒,是通过萤火虫荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶。荧光素酶在Mg2+和O2参与下催化荧光素氧化成oxyluciferin,在荧光素的氧化过程中,发出生物荧光(bioluminomescence),然后通过化学发光仪或液闪测定仪测定生物荧光。
试剂盒组分:
| 组分 | 100T | 500T | 1000T |
| 细胞裂解液 | 60mL | 5×60mL | 10×60mL |
| 萤火虫荧光素酶检测试剂 | 10mL | 5×10mL | 10×10mL |
保存条件:-20℃避光保存,有效期为6个月;-70℃避光保存,有效期为1年。试剂盒内萤火虫荧光素酶检测试剂不能反复冻融,建议分装保存
产品特点:
1.简便,快捷。
2.灵敏度高,可检测10-20mol的荧光素酶。
3.安全,非放射性。
4.酶的浓度线性范围可达8个数量级。
注意事项:
1.温度会对酶的活性会产生影响,因此所有试剂应放置室温后再使用;
2.单管荧光测定仪测定,每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致;
3.萤火虫荧光素酶催化的生物发光的最强发光波长为560nm;
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
实验步骤:
1.细胞裂解:
1)将转入报告基因的细胞中的培养基移除,加PBS轻轻洗涤。按如下方案加入细胞裂解液,然后将培养板放在微型振荡器上室温振荡15min,充分裂解细胞。
| 细胞培养板 | 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 |
| 细胞裂解液(μl/孔) | 30μl | 60μl | 120μl | 250μl | 500μl |
注:裂解产物可室温保存6h,4℃保存16h,-70℃可长期存放。(裂解产物不能多次反复冻融)。
2)将充分裂解后的裂解产物,10000-15000rpm离心3-5 min。离心后将上清液移入新的EP管中进行后续检测。
2.荧光素酶检测:
1)按照仪器说明书要求将荧光测定仪打开,设定参数,测定时间为10 s,测定间隔为2 s。
2)将样品按照20-100μL的体积(如果样品量足够,请加入100μL)加入测量管中(保持每次样品的加样量一致),另外加入100μL萤火虫荧光素酶检测试剂,混匀2-3次(不能漩涡混匀),充分混匀后测定RLU(Relative light unit),同时设置细胞裂解液为对照孔。
我公司销售的萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验好像现在比较常用的是双报告基因检测吧,可以解决你说的问题 huxueliang 利用双荧光素酶报告基因系统 同时转入内参质粒 天飒 huxueliang 麻烦你讲讲利用双荧光素酶报告基因系统 ,同时转入内参质粒吧,我是一名新手这方面知道的少,谢谢啦! 叮当儿 promega公司的双荧光素酶标记系统,好多人都在用,同时转入要检测的报道基因及Renillia,操作的话说明
longgyin8341 我想研究细胞在氧化应激损伤过程中核受体NFkB对于下游一些目的基因(如ICAM-1等)转录调控的影响,是不是需要把NFkB在基因组上的特异性结合元件克隆出来,与虫荧光素酶报告基因质粒构建重组质粒,然后转染细胞? 若是如此:NFkb由于可以调控多种下游基因的表达,它在基因组上每个调控基因的结合序列都是特异的吗?或者说这段序列是固定的吗?如何在网上找呢?谢谢 longgyin8341
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