北京SY0185型ATF6-GFP报告基因质粒报价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京SY0185型ATF6-GFP报告基因质粒报价由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多ATF6-GFP报告基因质粒等报告基因检测产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京SY0185型ATF6-GFP报告基因质粒报价
英文名：ATF6 GFP Reporter Plasmid
产地：国产|进口
编号：SY0185
品牌：百奥莱博
ATF6-GFP报告基因是用于检测ATF6转录活性水平为目的的报告基因。ATF6(Activating Transcription Factor 6)是一种内质网应激调节时的跨膜转录因子。内质网中错误折叠蛋白的积累将导致ATF6的溶蛋白性裂解。胞质部分的ATF6进入细胞核作为转录因子引起ER chaperones的转录。ATF6的激活将预示着多种疾病的发生，例如：心肌梗塞、动脉粥样硬化和神经退化疾病等。

ATF6-GFP报告基因主要用于检测细胞中ATF6信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMATF6-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个ATF6结合位点，可以高效地检测ATF6的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得ATF6-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM ATF6 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMATF6-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

北京SY0185型ATF6-GFP报告基因质粒报价极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·逆转录酶
编号：SY0293
英文名称：M-MLV (H-) Reverse Transcriptase
规格：5000U
本品适用于第一链cDNA合成，cDNA 片段长度最高可达12kb。也可用于低拷贝基因的检测。野生型的M-MuLV包含RNase H活性，该活性可催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因而在cDNA 第一条链的合成过程中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA，本品为通过基因重组技术得到的点突变型RNase H活性缺失的逆转录酶，即M-MLV (H-) Reverse Transcriptase，与M-MuLV相比，不仅改善了模板RNA可能被降解情况，且具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建。

注意事项

1）为保证反转录成功，建议使用高质量的RNA样品。
2）请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free，以防止RNase污染。
3）如果RNA模板GC含量丰富或者具有复杂的二级结构，可以先只加RNA模板、引物和RNase free H2O混匀，65℃变性5min，冰上冷却，短暂离心后加入其他成分继续下面的反转录步骤。
4）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用方法

1第一条链cDNA合成（以20μl反应体系为例）
1.1 按照表【1】配制反应体系

 

RNase free ddH2O	to 20μl
5×Reaction Buffer	4 μl
dNTP Mixture (10 mM each)	1 μl
Oligo(dT)18(0.5μg/μl)
or Random hexamer (0.1μg/μl)
or GSP(Gene Speicific Primer)(2 μM)	1 μl
RNase inhibitor (40 U/μl)	0.5 μl
M-MLV (H-) Reverse Transcriptase	1 μl
模板RNA	Total RNA: 50ng-5μg mRNA: 5-500ng
表1 cDNA第一条链合成反应体系表

1.2 轻轻混匀
若使用Oligo(dT)18或基因特异性引物，42℃孵育50min。
若使用Random hexamer，25℃孵育10min，42℃孵育50min。

1.3 65℃加热15min失活M-MLV (H-) Reverse Transcriptase。

2 RT-PCR
建议取1/10～1/5体积（2～4µl）的反转录产物作为PCR模板。
2.1 按照【表2】配制反应体系表
组分体积终浓度

cDNA模板	2μl	依需要调整
Forward Primer (10μM)	1μl	0.2 μM each
Reverse Primer (10μM)	1μl	0.2 μM each
10×Taq Buffer(含Mg2+)	5 μl	1×
2.5mM dNTPs	4μl	0.2 mM
Taq DNA Polymerase	0.5μl	2.5units
ddH2O to final volume	50μl	/
表2 RT-PCR反应体系表

2.2 按下列条件进行PCR反应：


储存条件：-20℃。


北京SY0185型ATF6-GFP报告基因质粒报价关键词：ATF6-GFP报告基因质粒,ATF6 GFP Reporter Plasmid,SY0185


·通用型动物组织PCR试剂盒
编号：SY0049
英文名称：Animal Tissue Direct PCR Kit
规格：50T|200T
该试剂盒可用于转基因型鉴定、动物基因分型等多种大规模基因检测。动物组织直接PCR试剂盒是一种可直接对不同动物组织进行PCR扩增的试剂盒，适应性广、稳定性强。试剂盒中采用独特的裂解缓冲液体系，可以简便快速的裂解多种动物组织样品并释放出基因组DNA。整个过程不需要除去蛋白、RNA及其它次生代谢物，也无需有机溶剂抽提，即可得到质量稳定的基因组DNA，无需后续纯化步骤即可直接用于PCR反应。而且样品需求量小，少到5mg动物组织即可进行实验。

试剂盒中提供的 2×Tissue Master Mix 具有很强的扩增兼容性，能直接以待测样品裂解液为模板，进行高效特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合物，包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分，并以dUTP替代了dTTP，另外加入了能够降解含有dUTP 模板的 UNG 酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR产物，UNG 酶对不含有尿嘧啶的模板不会造成任何影响，从而保证扩增的特异性和准确性，防止了大规模基因检测时可能出现的PCR产物污染问题。优化的2×Tissue Master Mix与直接裂解液配合使用能够快速简便地对样品进行检测，并具有灵敏度高、兼容性强、特异性强、稳定性好等特点。

产品组分：

组分	50T	200T	储存
2×Tissue MasterMix*	500 μl	1 ml×2	-20℃
Buffer AL	5 ml	20 ml	室温或4℃
Protease	220 μl	880 μl	4℃
6×DNA Loading Buffer	1.5ml	1.5ml	4℃

注：2×Tissue Master Mix中包含Tissue Taq DNA 聚合酶、UNG酶、dNTP（dUTP替代了dTTP）、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂和稳定剂。

保存方法
① 本试剂盒的2×Tissue Master Mix保存在-20℃，避免反复冻融。
② Buffer AL在常温干燥条件下，可保存12个月，如需保存更长时间可置于4℃。
③ Protease溶液具有独特配方，常温保存（25℃）可长期具有活性，在4℃保存，其活性和稳定性会更好，因此建议将其置于在4℃保存，请勿置于-20℃保存。

注意事项
1）本试剂盒适用于常规PCR，请勿用于多重PCR鉴定；建议扩增片段在1kb以内。
2）注意实验用具的清洁以及实验的操作手法，避免样本间的交叉污染。
3）建议采用新鲜采取的动物组织，若为长期冷冻组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板的降解，影响PCR效率。
4）Buffer AL若低温保存，容易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间，也可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀，混匀后再使用。
5）电泳检测时，切勿使用含有 SDS 的 Loading Buffer，否则在电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带，影响实验结果。
6）建议设立阳性及阴性对照反应。阳性对照可用50ng纯化的动物DNA为模板，阴性反应以ddH2O为模板，引物可采用以前成功扩增的引物。
7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法

1. 取5-10mg动物材料，置于离心管中。尽量剪碎动物材料，以使之后的酶解反应容易进行。
2. 取100μl Buffer AL并加入4μl Protease，涡旋混匀。
3. 向混合液中加入动物组织，涡旋混匀。
4. 65℃孵育10-30min，然后95℃处理5min。
【注】：65℃孵育，一般只需10min即可满足多数PCR需求。若需要的DNA量较大或样品较难酶解，可以将时间延长至30min。组织块不需完全酶解，残余的部分在后续离心步骤中可被除去。
5. 12,000 rpm (~13,400×g )离心5min。
6. 转移上清至新的离心管，4℃或-20℃放置备用或直接用于PCR扩增。
【注】：用于后续PCR检测时，模板量占PCR体系的1-10%之间最佳，不能超过20%。如50μl 的PCR体系中，加入0.5-5μl 裂解液即可，但不能超过10μl。
7. PCR反应体系配制*
按照下表配制PCR反应体系，配置好反应体系后，短暂涡旋充分混匀并瞬时离心，将所有试剂收集到管底。

ddH2O	Up to 20μl
2×Tissue Master Mix	10μl
正向引物（10μM）	0.5μl
反向引物（10μM）	0.5μl
模板 DNA	xμl

【*】：① 配制的PCR反应体系可根据所需终体系（如50μl）按照该比例进行调整。
② 通常引物终浓度为0.2-0.25μM可以得到较好结果。反应性能较差时，可以在0.1-0.5μM范围内调整引物浓度。
8. PCR反应条件设置
此表PCR反应条件仅供参考。PCR反应条件因模板、引物等的结构条件不同而各异。具体操作中需要根据模板类型、目的片段大小、扩增片段的碱基序列和引物的GC含量及长短等具体情况来优化最佳的反应条件，包括退火温度，延伸时间等。

循环步骤	温度	时间	循环数
UNG酶处理	50℃	5min	1
灭活UNG酶&预变性	94℃	5min	1
变性	94℃	10sec	30-40循环
退火a	50-65℃	20sec
延伸b	72℃	30 sec/kb
彻底延伸	72℃	5min	1

【注】：a. PCR程序中的退火温度需根据引物的Tm值自行设置；
b. 延伸时间需要根据片段的长度来确定，对于1kb以内的DNA片段，建议延长时间为30秒。


北京SY0185型ATF6-GFP报告基因质粒报价关键词：ATF6-GFP报告基因质粒,ATF6 GFP Reporter Plasmid,SY0185

高效RNA保存液 100ml
ARB10590 人血小板因子4(PF-4/CXCL4)elisa测定使用说明书 Human platelet factor 4,pf-4 ELISA KIT
288-32-4 Imidazoie   咪唑
乳酚油                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                              100ml
青霉素链霉素两性霉素B溶液 Zinc Glycinate
F020229 羊抗鸡IgY IgG抗体 Goat Anti-Chicken IgY(IgG)
N-乙酰-神经*酸 Amberlite XAD2 131-48-6
还原辅酶Ⅰ抑制剂 Trypan blue
ARB11463 人胰岛素(INS)酶联免疫定量检测 Human insulin,ins ELISA KIT
ARB11747 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员1(EAR1)elisa检测操作说明书 Human eosinophIL-associated ribonuclease a family member 1,ear1 ELISA KIT
1kb DNA  Ladder Ⅱ Urease(jack bean)
总胆红素(TBIL)检测试剂盒(BOD比色法)   50T
9032-75-1 PectolyaseY-23 果胶酶Y-23
ARB13631 兔子透明质酸(HA)含量测试 Rabbit hyaluronic acid,ha ELISA KIT
EA65染色液   100ml|500ml
FMOC-L-丝*酸 PCNB 73724-45-5
ARB10177 人α1抗胰蛋白酶(α1-AT)酶标法分析 Human α1-antitrypsin,α1-at ELISA KIT
F050301 兔IgG抗体 Rabbit IgG
ARB13210 小鼠高敏甲状腺素(u-T4)Elisa分析 Mouse ultrasensitivity thyroxine,u-t4 ELISA KIT

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