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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
488
- 英文名:
BL21 (DE3) Chemically Competent Cell
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
- 规格:
100μl×10管
特别提示:包括BL21 (DE3)化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:BL21 (DE3)化学感受态细胞
英文名称:BL21 (DE3) Chemically Competent Cell
产品货号:SY0014
产品规格:100μl×10管
本品是在大肠杆菌BL21(DE3)菌株基础上制备的化学转化感受态细胞,是以T7 RNA聚合酶为表达系统的基因的高效表达宿主,其基因型为F-ompT hsdS (rB- mB-) gal dcm (DE3)。经检测,本品无外源质粒DNA残留,转化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA。适合非毒性蛋白重组表达。
组份:
BL21 (DE3)化学感受态细胞 100μl×10
pUC19(0.1 ng/μl) 5μl
注意事项
1)感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。
2)待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。
3)待转化DNA加入感受态细胞后,请勿用移液枪吹打,轻轻弹匀即可。
4)为确保最高效率转化,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。
5)本品应于-80℃保存,请勿将感受态细胞储存于-20℃或液氮中保存。
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1)将感受态细胞从-80℃中取出,置于冰水浴中融化。
2)将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30分钟。
3)42℃水浴,不要晃动,准确热激90s后,立刻置于冰水浴中,静置2-3分钟。
4)向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基,37℃水浴锅中静置10分钟。
5)150 rpm, 37℃振荡培养45分钟,使菌体复苏,抗性基因表达。
6)2,500 g离心5分钟,去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬,用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培养过夜。
【注】:也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之内都可重新涂板。
储存:-80℃。
我公司销售的BL21 (DE3)化学感受态细胞北京现货,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3
(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3
【交流】转载:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别
1:DH5a菌株 DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。 基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动
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