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- 百奥莱博
- JN0168-KCJ
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
426
- 英文名：
Endo H
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
10KU
特别提示：包括糖苷内切酶H在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：糖苷内切酶H
英文名称：Endo H
产品货号：JN0168
产品规格：10KU
本酶是一种重组糖苷酶，能够对N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖核心结构进行切割。本制品克隆自褶皱。链霉菌并在E.coli中重组表达，多步纯化获得。糖苷内切酶H用于去除糖蛋白中的N-连接高甘露糖。
产品组成：
| 组份 | 规格 |
| ENDO H（5000U/μl） | 20μl |
| 10×糖蛋白变性缓冲液 | 1ml |
| 10×ENDOH反应缓冲液 | 1ml |
10×糖蛋白变性缓冲液：5% SDS,400mM DTT
10×ENDOH反应缓冲液：500mM 柠檬酸钠 pH5.5储存于25℃。
切割位点：Endo H仅切割高甘露糖型结构(n=2-150，x=(Man)1-2，y=H) 和杂合型结构 (n=2，x和/或y=AcNeu-Gal-GlcNAc)
活性定义：10μl的反应体系中，37℃条件下，1小时从10μg变性 RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需的酶量。
反应条件：将1×糖蛋白在糖蛋白变性缓冲液（含0.5%SDS，40mM DTT）中100℃煮沸10分钟使其变性；再在1×反应缓冲液(50mM 柠檬酸钠pH 5.5 储存于 25℃)中于37℃温育。
注意事项：酶活性不受SDS影响。要使天然糖蛋白去糖基化，或许需要增加酶量并延长温育时间。
质量保证：无外切糖苷酶污染，无蛋白水解活性。
储存液：20mM Tris, 50mM NaCl, 5mM EDTA pH7.5
储存条件：-20℃。
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文献和实验2021 年 8 月 25 日，北京医疗保障局公布，将基因甲基化检测纳入甲类医保服务项目及甲类工伤保险项目；同样在 9 月 24日，多款基因甲基化检测产品被纳入海南医保价格目录。 图 1 .北京市和海南省医保局发布新增医疗项目表（部分） 许多研究表明，肿瘤与一系列基因和表观遗传的异常改变有关。细胞生长和分裂过程中涉及到的关键通路发生了基因突变或表观遗传改变，就可能会诱导肿瘤的发生。在肿瘤细胞 DNA
，例如细菌的质粒、噬菌体、病毒等，常用的载体一般为质粒；根据需要可直接从公司购买合适的载体，也可以自己构建。（3）连接：目的 DNA 片段和适当载体的连接, 一般采用核酸内切酶分别消化 DNA 片段和载体，使它们的末端能够连接到一起构成重组 DNA 分子。由于所用内切酶的切割特点不同，产生三种连接方式：粘端连接、平端连接和不相配的连接。（4）转化：将连接的重组 DNA 产物导入合适的宿主细胞，使其在宿主细胞内复制扩增或表达，赋予宿主细胞新的生物特征。（5）克隆化：重组 DNA 分子转化大肠杆菌后，在平板
生长的菌落即为阳性菌落。【操作步骤】 1．制备含有Amp 和 Kan 的LB琼脂培养板2．将100μl 转化菌液用无菌涂布器均匀涂布于含有Amp 和Kan培养板上，37℃培养12-16h 。3．在含有Amp和Kan培养板上能生长的菌落即为阳性重组质粒。并将其接种于含Kan的LB液体培养基2ml中培养8-16h。4．小量制备质粒，限制性酶切分析进一步鉴定。二、α互补筛选 【实验原理】 适用于含有半乳糖苷酶基因（LacZ）的载体，如 pUC系列等，其原理是：载体含有LacZ的调控序列和N端146个氨
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