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文献和实验常见表位标签和序列常用表位标签的生物化学特性总结如下:氯霉素乙酰转移酶(CAT)这个 24kDa 大小的标签也用作报道基因,与大多数蛋白质融合时依然能保留其活性。这意味着它可以用来直接测量表达水平,而不需要 PAGE 或免疫检测。二氢叶酸还原酶(DHFR)这个 25kDa 蛋白质参与胸苷生物合成途径。带有这个标签的蛋白质的纯化可以通过甲氨蝶呤连接的树脂实现。FLAG带电的八肽序列(DYKDDDDK),可用于蛋白检测,特别是在串联为 3xFLAG™表位(DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDK
-tagTM的优点 SNAP-tagTM无论在体内还是体外都可以特异性并快速与其配体,即BG衍生物发生特异性反应,以共价键结合。由于BG可带各种不同的其它化学基团,如生物素、荧光素(fluorescein)、若丹明(rhodamine)等,从而实现一种标签蛋白可以被多种配体标记,是一种具有***性意义的自我标记蛋白标签。 SNAP-tagTM大小为22kDa,在很多常见表达系统中都能够良好表达。目前为止,已有相当数量和种类的蛋白质作为N末端和C末端SNAP-tag融合蛋白被成功表达
or mass spectrometry.图示:S-亚硝基化 Weste Blot 试剂盒标记和检测 S-亚硝基化的反应。样品首先与 MMTS 反应,封闭 S-亚硝基化蛋白质中的游离巯基。然后用抗坏血酸盐选择性还原 snitroscysteine,并用 Thermo Scientific iodotmt zero 标记试剂进行标记。随后,使用提供的抗 TMT 抗体在免疫印迹中检测 TMT 标记蛋白。5、Methylation:一碳甲基转移至氮或氧(分别为 N-和 O-甲基化)至氨基酸侧链,增加了蛋白质的疏水
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