SPA-PEG-SPA,聚乙二醇-双丙酸琥珀酰亚胺酯,分子量

应用包埋前免疫胶体金直接法研究细胞内病毒抗原超微定位

，计算出稳定1 ml 5 nm胶体需SPA 6 μg.（2）SPA胶体金复合物的纯化及鉴定 按上述最适浓度将SPA与胶体金混合，加入1%聚乙二醇2000(PEG-2000)使其最终浓度为0.05%，60 000 r/min, 4℃，离心1 h，于透射电镜下摄片鉴定其大小均一性。7、包埋前胶体金标记细胞内抗原的电镜观察 HSV-1 SM44感染HEL细胞12 h，细胞病变至++，用PBS洗3次，橡皮帚刮下细胞，1 500 r/min，离心10 min，细胞沉淀悬浮于0.5 ml 1%多聚

胶体金标记蛋白的制备

4. 1%聚乙二醇（PEG，分子量20KD）； 5. 0.05mol/L，pH9.0硼酸盐缓冲液； 6. 10% NaCl溶液； 7. 超速离心机。 操作方法 1. 待标记蛋白质前处理：将待标记蛋白溶液预先对0.05mol/L ，pH7.0 NaCl 4℃透析过夜，去除多余的盐离子，再经10000g 4℃离心1h，去除聚合物。 2. 胶体金溶液的前处理：胶体金对蛋白质的吸附主要取决于pH值，在接近蛋白质的等电点或略偏碱的pH条件下，二者容易形成牢固

免疫胶体金(Immune colloidal gold)

将胶体金和 IgG 溶液分别以 0.1Mol/L K2 CO3 调 pH 至 9.0 ，电磁搅拌 IgG 溶液，加入胶体金溶液，继续搅拌 10min ，加入一定量的稳定剂以防止抗体蛋白与胶体金聚合发生沉淀。常用稳定剂是 5 ％胎牛血清（ BSA ）和 1 ％聚乙二醇（分子量 20KD ）。加入的量： 5 ％ BSA 使溶液终浓度为 1 ％； 1 ％聚乙二醇加至总溶液的 1 ／ 10 。 5 ．胶体金标记蛋白的纯化 （ 1 ）超速