植物线粒体膜蛋白提取试剂盒北京品牌

特别提示：包括植物线粒体膜蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：植物线粒体膜蛋白提取试剂盒
英文名称：Plant mitochondrial membrane protein extraction kit
产品货号：HR0147
产品规格：50T|100T

线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器，细胞中的能源物质-脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化，并通过偶联磷酸化生成ATP，供给细胞生理活动之需。
跨膜蛋白承担各种生物功能，在生物的各种发展过程中扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。
植物线粒体膜蛋白提取试剂盒用简便快速的方法可以从各种植物样本中提取线粒体膜蛋白，提取过程简单方便，可在一小时内提取得到高质量的线粒体膜蛋白。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的膜蛋白具有天然活性，提取的蛋白可用于Western Blotting、免疫共沉淀、酶活性测定等各种下游蛋白研究实验。

储存条件：蛋白酶抑制剂-20℃保存；提取液2-8℃保存；膜蛋白溶解液室温保存。
有效期：一年。

产品特点：
1．使用方便。
2．将蛋白提取的时间缩短至1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

1．取新鲜植物样本叶片，洗净擦干后去除叶梗和粗脉。
2．取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的2g植物组织样本剪碎，采用以下一种方法处理：
I、加入3ml提取液A 后用匀浆机/匀浆器匀浆。
II、置于研钵中用液氮研磨，研磨后加入 3ml冷的提取液A 。
III、加入3ml提取液A 直接置冰上研磨。
3．将匀浆用 250目细胞筛或3层纱布或脱脂棉过滤。或者在4℃，100×g 力条件下离心1分钟，收集上清，弃沉淀。
4．将滤液700g离心10分钟。取上清。
5．将上清 11000-12000g离心20分钟。
6．弃上清，在沉淀中加入500μl 取液B和2μl蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后在冰上静置1-2小时，中间每隔15-20分钟高速涡旋振荡15秒。
7．在 4℃，12000×g条件下离心5分钟，取上清。
8．在上清中加入 5μl 提取液C，充分混匀。
9．在 37℃水浴10分钟。
10．在 37℃ 800-1000g离心2分钟。
11．此时溶液分为两层，小心移除上层，保留下层溶液，大约50μl。
12．用 50-150μl膜蛋白溶解液稀释下层溶液，即得线粒体膜蛋白。
13．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或调整相应的浓度后直接用于下游实验。

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