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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
血清、血浆、组织液等液体样本
- 库存:
12
- 标记物:
HRP(辣根过氧化物酶)
- 适应物种:
人、动物
- 应用:
科学研究
- 检测方法:
酶联免疫
- 检测范围:
15.6-1,000pg/mL
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
96T
英文名称:ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8)
简称:CXCL8; AMCF-I; GCP1; K60; LECT; LUCT; LYNAP; MDNCF; MONAP; NAF; NAP1; SCYB8; TSG1; B-ENAP; Neutrophil-Activating Protein 1; Granulocyte Chemotactic Protein 1
物种:Cavia (Guinea pig ,豚鼠)
实验方法:双抗夹心
反应时长:3h
检测范围:15.6-1,000pg/mL
灵敏度:最小可检测剂量小于等于5.7pg/mL
样本类型:Serum, plasma, tissue homogenates, cell lysates, cell culture supernates and other biological fluids
特异性:本试剂盒用于检测白介素8(IL8),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
精密度:精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差: CV<10%
批间差: CV<12%
应用(仅供研究使用,不用于临床诊断!)
实验原理:将白介素8(IL8)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的白介素8(IL8)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的白介素8(IL8)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素8(IL8)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
稳定性:经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
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文献和实验预期应用本试剂盒运用双抗体夹心 ELISA 法定量测定人组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体中 IL8Ra 含量。试剂盒内容试剂名称数量试剂名称数量96孔板(预包被)196孔板覆膜2标准品2标准品稀释液1×20mL检测溶液A1×120μL检测稀释液A1×12mL检测溶液B1×120μL检测稀释液B1×12mLTMB底物1×9mL终止液1×6mL浓洗涤液(30×)1×20mL使用说明书1需自备的设备及试剂1.450±10nm 滤光片的酶标仪 (建议仪器使用前提前预热)2.单道或多道微量加液器及吸头
一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
(1)耳缘剪口采血 将耳消毒后,用锐器(刀或刀片)割破耳缘,在切口边缘涂抹20%柠檬酸钠溶液,阻止血凝,则血可自切口自动流出,进入盛器。操作时,使耳充血效果较好。此法能采血0.5mL左右。 (2)心脏采血 取 血前应探明心脏搏动最强部位,通常在胸骨左缘的正中,选心跳最显的部位作穿刺。针头宜稍细长些,以免发生手术后穿刺孔出血,其操作手法详见兔心脏采血。因 豚鼠身体较小,一般可不必将动物固定在解剖台上,而可由助手握住前后肢
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