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- 英文名:
Polymo p hprep
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中性粒细胞分离液Polymorp hprep
- 保存条件:
Polymorp hprep
- 供应商:
中性粒细胞分离液Polymorp hpr ep
- 库存:
大量
- 规格:
250ml
货号:1895
您是否了解中性粒细胞呢?中性粒细胞(neutrophil)来源于骨髓中造血干细胞,具有分叶形或杆状的核,胞浆内含许多弥散分布的细小的浅红或浅紫色的特有颗粒,内含髓过氧化物酶、溶菌酶、吞噬素和酸性水解酶等丰富的酶类。在正常人体外周血中,占全部白细胞比例达到55~70%,与细胞的吞噬和消化功能密切相关。
主要成分:
Sodium Diatrizoate(泛影葡胺纳):13.8 % (w/v)
Dextran 500(葡聚糖):8.0 % (w/v)
物理化学特性:
密度 1.113 ± 0.001 g/ml
渗透压 445 ± 15 mOsm
内毒素含量 < 1EU /ml
操作步骤:
十分简单,与传统的淋巴细胞分离液无异
1. 取全血,无需稀释,直接1:1小心倾倒于Polymorp hprep™液面,
2. 30-35min,500g离心,注意缓升缓降
人多形核细胞分离液/Isolation of human polymorphonuclear cells
Polymorph prep是一种即用型、无菌、内毒素含量很低的分离人外周血中多形核白细胞 (PMN:polymorphonuclear leukocytes)的分离液。
人血液中,除嗜碱性粒细胞外,多形核白细胞 (PMN:polymorphonuclear leukocytes) 的浮力密度比单个核细胞大得多,>1.085 g/ml。不幸的是,红细胞的浮力密度往往为 1.09 – 1.11 g/ml,这使得使用类似于用于单个核细胞的密度屏障从全血中分离更加困难。
为了克服这些困难,已经开发了许多方案。
Polymorp hprep 的高渗透压导致红细胞失水并收缩,从而增加其有效浮力密度。这允许葡聚糖聚集的红细胞通过致密介质迅速沉淀。
因为分离介质和红细胞之间的渗透梯度随着细胞进一步沉降到分离介质中而下降(即红细胞的水分损失在 Polymorph prep 的顶部最大,随着它们进一步沉降而逐渐降低)——泛影酸盐梯度在内部形成密度屏障。 PMNs 带处于此密度梯度内,而单个核细胞则保持在样品/介质界面处。
该方法仅对未稀释的全人血有效,对富含白细胞的部分或来自动物物种的血液无效。
温度对于获得最佳结果很重要,因为温度的变化会影响 Polymorph prep 溶液的密度和粘度。 血样和分离介质的温度应保持在 18 – 22 °C 之间。使用 Coulter STKR 细胞分析仪对 Polymorp hprep 分离的顶部和底部条带进行分析,如右图所示。 分析仪将样品中的细胞数量(纵坐标)确定为细胞体积(横坐标)的函数。 相对细胞数是特定体积的细胞数,表示为每个样品中细胞总数的一部分。
Polymorp hprep 顶部的细胞带仅包含外周血单个核细胞 (PBMC)。 细胞带本身可分为淋巴细胞(上层,1)和单核细胞(下层,2)。
所有的 PMN 都位于底部细胞带中,该带包含在 Polymorph
prep 溶液中。 红细胞对 PMN 条带的污染占总细胞数的 2 – 6 %。
相关技术参数:
| 泛影酸钠/Sodium diatrizoate | 13.8 % (w/v) |
| 聚蔗糖/Polysucrose | 8.0 % (w/v) |
| 密度/Density | 1.113 ± 0.001 g/ml |
| 渗透压/Osmolality | 445 ± 15 mOsm |
| 内毒素/Endotoxins | < 1.0 IU/ml |
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