SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×)

SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×)
产品简介：
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液即SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×)，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
Leagene SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×)常用于SDS-PAGE蛋白样品的上样，含少量DTT，但不含有毒物质β-巯基乙醇。
 

编号 名称	PE0025	PE0025	PE0025	Storage
SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×)	1ml	5×1ml	10ml	-20℃
使用说明书	1份

操作步骤(仅供参考)：

在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×,含DTT)，水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。使用完毕后应置于-20℃保存。

取适量的蛋白样品和SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×)按4:1混合，充分混匀。如40μl蛋白样品加入10μl上样缓冲液 (5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。

95℃水浴加热5～10min，以充分变性蛋白。

冷却到室温后，经10000~14000rpm离心2~5min，取上清直接上样电泳。

通常电泳至蓝色染料到达PAGE胶的底部附近即可停止。

注意事项：

Leagene SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×)中含少量DTT，有轻微刺激性气味。

SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×)必须完全溶解后再使用。建议根据使用量和频率分装冻存，应避免反复冻融。

本产品用于蛋白变性时，建议95ºC水浴或PCR仪加热5分钟，温度过高(如100ºC)或时间过长(如超过15分钟)，有可能会导致蛋白降解或上样缓冲液中指示剂的颜色异常。

本产品含有溴酚蓝指示剂，pH受温度影响，颜色可能有所不同；低温冻存条件下，呈深棕色~深蓝色凝固状态，不影响正常使用。

本产品稀释至1X后可以直接用于细胞或组织样品的裂解。

加热前通常会发现蛋白样品内有粘稠的半透明状物体，通常在本上样缓冲液内95℃水浴加热8~10分钟后可使该粘稠的半透明状物体消失，便于后续的上样操作。如果起始时细胞或组织的用量较大，基因组DNA含量较高，加热5~10分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体，此时需要再加热5-10分钟或者加入适量1X的蛋白上样缓冲液后再加热3~5分钟。充分加热后一方面可以使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放，同时会导致基因组DNA的部分断裂从而使粘稠感消失，这样就不会影响后续的上样操作了。适当超声或使用1ml注射器反复抽吸也可以打断基因组DNA从而使粘稠感消失。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。