DNaseⅠ溶液（1mg/ml）

直链淀粉和支链淀粉的测定(双波长法)

乙醇（ 3 ） 0.5 ml / L KOH 溶液（ 4 ） 0.1 mol / L HCl 溶液（5） 碘试剂：称取碘化钾 2.0g， 溶于少量蒸馏水，再加碘 0.2g， 待溶解后用蒸馏水稀释定容至 l00ml.（6） 直链淀粉标准液：称取直链淀粉纯品 0.1000g， 放在 100ml 容量瓶中，加入 0.5mol/ L KOH 10ml， 在热水中待溶解后，取出加蒸馏水定容至 100ml， 即为 1mg/ml 直链淀粉标准溶液。 （7） 支链淀粉标准液：用 0.1000g 支链淀粉按 （6） 法制备成 1mg

人或动物脑毛细血管原代内皮细胞的分离

血管，取皮质灰质，用匀浆机将其制成匀浆。 2. 用10μg/ml DNaseⅠ和1mg/ml胶原酶溶液，37℃，消化脑组织1h。吸去上清，将沉淀悬浮于250g/L BSA的PBS中，4000r/min离心10min，去除悬浮的脂肪细胞碎片和髓磷脂。 3. 将沉淀物重新悬浮于上述消化液中，37℃消化1-3h。消化产物先过230μm尼龙筛，再过150μm尼龙筛，以去除大血管、细胞碎片等。 4. 收集微血管。将滤过液通过60μm尼龙筛，以便收集微血管内皮细胞。将筛子

碱裂解法提取质粒DNA的研究

的方法进行质粒DNA的提取，所用具体试剂见表1: ①挑取单菌落，接种于4. 0mlLB (含氨苄青霉素)液体培养基中， 37℃、250 rpm振荡培养过夜(约12～14h) 。②取1. 5ml培养物加入Eppendorf管中，室温12000g离心1min，弃上清。③将细菌沉淀重悬于100μl预冷的溶液Ⅰ中，剧烈振荡，使菌体分散混匀。④加200μl新鲜配制的溶液Ⅱ，颠倒数次混匀(不要剧烈振荡) ，并将离心管放置于冰上2min。⑤加入150μl预冷的溶液Ⅲ，将管温和颠倒数次混匀冰上放置3min。⑥加入