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无RNase的DNase溶液促销

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  • ¥180 - 2270
  • 百奥莱博
  • BTN90903-ZCE
  • 北京
  • 2025年07月12日
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    • 英文名

      RNase-Free DNase Solution

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      低温运输,-20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应无RNase的DNase溶液促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:无RNase的DNase溶液促销
    规格:500U
    品牌:百奥莱博
    产地:国产|进口
    英文名:RNase-Free DNase Solution
    本产品是从牛胰DNase中精制的无RNase污染的DNase,专门用于降解RNA样品中的DNA污染。

    产品特点:
    1.高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平。
    2. 同时降解单链DNA和双链DNA。
    3. 不含RNase,可以保证RNA分子完整性不受任何影响。
    4.反应条件经过优化,可以用于快速降解硅胶膜上吸附的DNA,也可以用于快速降解液体反应体系中的DNA。
    5.可以用于总RNA提取和体外转录中去除DNA。也可用于切口平移(Nick Translation)和DNase印迹法研究DNA-蛋白质相互作用。

    产品组成:

     
    成分 规格
    RNase-free DNase(1U/μL) 300μl
    10×DNase Buffer 300μl
    50mM EDTA溶液 300μl
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:

    一、去除RNA样品中污染的基因组DNA(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
    1.在一无RNA酶的离心管中配制50μl的反应液:
    成分 用量
    RNA样品 1μg
    10×DNase Buffer 1μl
    RNase-free DNase(1U/μL) 1μl
    自备的RNase inhibitor(40U/μL) 0.5-1μL(可不加)
    补超纯水到 10μL

    2. 混匀,短暂离心,37℃放置30分钟;
    3. 加入2μl 50mM EDTA溶液,65℃放置15分钟。此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解,也可以使用酚/*仿抽提去除DNase,然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上,也可以使用本公司的RNAadsorp
    试剂盒进行柱式纯化,回收RNA。
    4.电泳检测是否去除了基因组 DNA,然后进行后续实验。

    二、除去硅胶膜离心吸附柱上的DNA(仅供参考,本试剂盒不含 RNase-free DNase以外的所需试剂)
    1.在柱式法提取过程中,完成洗涤步骤。
    2. 配制 50μl DNase工作液。
    成分 用量
    10×DNase Buffer 5μl
    RNase-free DNase(1U/μL) 10μl
    自备的RNase inhibitor(40U/μL) 0.5-1μL(也可不加)
    补超纯水到 50μL

    3. 加在离心吸附柱中间,室温放置5-30分钟。
    4. 加入0.5mL自备洗柱液洗涤两次。
    5. 用RNA洗脱液洗脱即得无DNA的RNA样品。

    三、除去RNA体外转录反应中的DNA模板(仅参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
    1. 按2 U RNase-free DNase/μg DNA模板的比例在RNA体外转录反应中加入RNase-free DNase。注意:酶的最佳用量也许需要优化。
    2. 37℃放置15分钟。
    3. 加入2μl 50mM EDTA溶液,65℃放置15分钟;此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解,也可以使用酚/*仿抽提去除DNase,然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上,也可以使用本公司的RNAadsorp试剂盒(需另购)进行柱式纯化,回收RNA。

    四、用于切口平移法(Nick Translation)DNA探针标记(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
    1. 按下表设置切口平移标记反应:
    成分 用量
    10×DNA聚合酶I缓冲液 2.5μl
    3 dNTP mixture,1mM each 1.25μl
    标记核苷酸:非标记核苷酸混合(3:7,1mM) 1μl
    RNase-free DNase(0.002U/μL,见注) 1μl
    DNA聚合酶 I(10U/μL) 0.5-1.5μl
    模板 DNA 0.25μg
    加水到 25μl

    注:稀释 RNase-free DNase的缓冲液为1×DNA聚合酶 I缓冲液:50mM
    2. 15℃放置 15-60分钟。
    3. 加入10μl 50mM EDTA溶液。
    4. 65℃放置 15分钟灭活酶。
    5. 所得探针可以纯化后使用,也可以直接使用。


    我公司的无RNase的DNase溶液促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
    水杨酸*酯 5-HIAA 118-55-8
    63-68-3 L-Methionine L-甲硫*酸/蛋*酸
    Molisch试剂   100ml
    尿素 Inositol 57-13-6
    BTN120507 Xa因子蛋白酶 Factor Xa Protease Xa
    NF-242 冻干抗人IgG血清
    PY02-437  改良LETHEEN琼脂基础  250克  
    ARB12996 小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)代做ELISA实验 Mouse anti-smooth muscle antibody,asma ELISA KIT
    L-酪*酸叔丁酯 Calcium DL-malate 16874-12-7
    ARB12131 大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)血清中含量检测 Rat paRathyroid hormone related protein,pthrp ELISA KIT
    *甲*(代"酚")绿指示剂   100ml
    6-*基青霉素酸 H-Lys-OEt?2HCl 551-16-6
    ARB13965 猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)酶免分析 Porcine insulin-like growth factors-1,igf-1 ELISA KIT
    dNTP混合液(2.5mM) 
    ARB11024 人尿激酶(UK)免费代测 Human urokinase,uk ELISA KIT
    糖化酶 Suberic acid 9032-08-0
    BTN100932 溶壁酶(破壁酶)干粉 Lywallzyme Powder
    无RNase的DNase溶液促销关键词:RNase-Free DNase Solution,无RNase的DNase溶液,BTN90903


    ·Tricine-SDS PAGE上样液
    编号:BTN81213
    英文名称:Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer
    规格:1mL
    本产品是专门用于Tricine-SDS-PAGE电泳样品上样用的缓冲液,其浓度为2×,配胶时即开即用,非常方便。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·一站式miRNA柱式大提试剂盒
    编号:BTN80906
    英文名称:One-stop miRNA column large-scale extraction kit
    规格:5次
    本试剂盒是在柱式miRNA提取试剂盒(BTN80104)基础上自主开发的大提升级产品,是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。

    试剂盒特点:
    1.样品处理量大,一次最多可以处理2g的样品。
    2.一步法直接分离纯化小RNA,比Ambion的两步法和PAGE电泳回收法更简单。整个过程只需要二十多分钟。
    3. 得到的小RNA 长度大部分在200nt以下,包括 5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
    4.小RNA 纯净,OD260/280一般都在1.9以上。无基因组DNA的污染。可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
    5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。
    6.适用范围广,可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。

    试剂盒组成:
    成分 规格
    溶液A 50ml
    溶液B 50ml
    溶液C 100ml
    离心吸附柱(大提) 10套
    通用洗柱液 100ml
    RNA洗脱液 5ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    由于离心吸附柱的吸附量限制,本产品每次提取只能处理2 g左右的各种组织,可以在50mL塑料离心管中操作。
    1. 新鲜配制裂解液20mL。将溶液A和溶液B按 1:1的比例混合(即溶液A和溶液B各10mL),然后根据组织细胞类型的不同分为下面几种情况使用。注意:溶液A和溶液B混合后必须立即使用,不要放置,否则会产生沉淀。如果产生沉淀,需加热到65℃使其溶解后才能使用。
    a)对贴壁细胞:吸尽培养液,按每10 平方厘米细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
    b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,按每 1-5×106悬浮细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
    c)对新鲜的动物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中,每克组织加10mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/ mL 裂解液,否则十分容易产生DNA污染。
    d)对新鲜的植物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
    e)对 RNAhold 保存动物或植物组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,放入50mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
    2. 将裂解物转移至一个干净的50mL塑料离心管中,然后加入0.2-0.3倍体积的自备*仿(1mL 裂解物需0.2-0.3mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
    3. 12000~15000g室温离心3~5分钟。
    4. 将上清液(约12-16mL)转移到一个离心吸附柱(大提)中以去除大RNA。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下部分上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。本试剂盒提供的离心吸附柱(大提)之间没任何区别,可以随机选一个做大RNA 吸附,另一个做小RNA 吸附。
    5. 12000~15000g室温离心离心吸附柱(大提)1分钟,收集管中的穿透液。大RNA 将与离心吸附柱的膜结合,小RNA 将存在于穿透液中。如果需要回收大RNA,请按附录的方法操作,但需要单独购买本公司的通用洗柱液和RNA 洗脱液。
    6.在穿透液中加等体积的溶液C,混匀。此时溶液的总体积约30mL。
    7. 分一次或分两次将混合液转移到新的离心吸附柱(大提)中,每次转移后需要12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液。
     注意:不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱(大提)。
    8. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中,12000~15000g室温离心1分钟,弃穿透液。
    9. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
    10. 12000~15000g室温离心1分钟以甩出残留液体。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 miRNA的使用。
    11. 将离心吸附柱(大提)转移到一自备的、50mL RNase-free 收集管中,加入0.5-1mL RNA 洗脱液。
    12. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的溶液即为miRNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。

    附录:
    1. 用 10mL自备的通用洗柱液洗涤结合有大RNA的离心吸附柱(大提)。
    2. 重复上步一次。
    3.干甩一次。
    4. 加入0.5-1mL RNA 洗脱液,室温放置2-3分钟。
    5. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的溶液即为大RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。


    无RNase的DNase溶液促销关键词:RNase-Free DNase Solution,无RNase的DNase溶液,BTN90903

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    ARB14222 人肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)酶免分析 
    乙酰胆碱酯酶 SDP 9000-81-1
    ARB13235 小鼠淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)免费代测 Mouse lymphotactin,lptn/ltn ELISA KIT
    9007-34-5 胶原蛋白Ⅱ型 Collagen TypeⅡ
    粘蛋白胭脂红 GDH-TPI 51395-97-2
    ARB10654 人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)代做ELISA实验 Human angiopoietin-like protein 3,angptl3 ELISA KIT
    淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法)   100T|200T

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    • 反转录过程中需要考虑哪些因素?

      完整性分析。 二、基因组 DNA 的去除 某些情况下,痕量基因组 DNA(gDNA)可能与 RNA 共同被纯化。污染 gDNA 可能会干扰反转录结果,导致 RT-qPCR 等高灵敏度实验出现假阳性、高背景或检测率降低。 为去除 gDNA,通常在 RNA 分离过程中加入 DNase I。在进行 RT-(q)PCR 之前,必须完全去除 DNase I,因为任何残留的酶都会使单链 DNA(如引物和 cDNA)降解。通常,DNase I 失活(如,EDTA 和加热处理)或酶去除步骤会导致 RNA

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