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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
539
- 英文名:
RNase-Free DNase Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应无RNase的DNase溶液促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:无RNase的DNase溶液促销
规格:500U
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:RNase-Free DNase Solution
本产品是从牛胰DNase中精制的无RNase污染的DNase,专门用于降解RNA样品中的DNA污染。
产品特点:
1.高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平。
2. 同时降解单链DNA和双链DNA。
3. 不含RNase,可以保证RNA分子完整性不受任何影响。
4.反应条件经过优化,可以用于快速降解硅胶膜上吸附的DNA,也可以用于快速降解液体反应体系中的DNA。
5.可以用于总RNA提取和体外转录中去除DNA。也可用于切口平移(Nick Translation)和DNase印迹法研究DNA-蛋白质相互作用。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| RNase-free DNase(1U/μL) | 300μl |
| 10×DNase Buffer | 300μl |
| 50mM EDTA溶液 | 300μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、去除RNA样品中污染的基因组DNA(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1.在一无RNA酶的离心管中配制50μl的反应液:
| 成分 | 用量 |
| RNA样品 | 1μg |
| 10×DNase Buffer | 1μl |
| RNase-free DNase(1U/μL) | 1μl |
| 自备的RNase inhibitor(40U/μL) | 0.5-1μL(可不加) |
| 补超纯水到 | 10μL |
2. 混匀,短暂离心,37℃放置30分钟;
3. 加入2μl 50mM EDTA溶液,65℃放置15分钟。此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解,也可以使用酚/*仿抽提去除DNase,然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上,也可以使用本公司的RNAadsorp
试剂盒进行柱式纯化,回收RNA。
4.电泳检测是否去除了基因组 DNA,然后进行后续实验。
二、除去硅胶膜离心吸附柱上的DNA(仅供参考,本试剂盒不含 RNase-free DNase以外的所需试剂)
1.在柱式法提取过程中,完成洗涤步骤。
2. 配制 50μl DNase工作液。
| 成分 | 用量 |
| 10×DNase Buffer | 5μl |
| RNase-free DNase(1U/μL) | 10μl |
| 自备的RNase inhibitor(40U/μL) | 0.5-1μL(也可不加) |
| 补超纯水到 | 50μL |
3. 加在离心吸附柱中间,室温放置5-30分钟。
4. 加入0.5mL自备洗柱液洗涤两次。
5. 用RNA洗脱液洗脱即得无DNA的RNA样品。
三、除去RNA体外转录反应中的DNA模板(仅参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1. 按2 U RNase-free DNase/μg DNA模板的比例在RNA体外转录反应中加入RNase-free DNase。注意:酶的最佳用量也许需要优化。
2. 37℃放置15分钟。
3. 加入2μl 50mM EDTA溶液,65℃放置15分钟;此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解,也可以使用酚/*仿抽提去除DNase,然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上,也可以使用本公司的RNAadsorp试剂盒(需另购)进行柱式纯化,回收RNA。
四、用于切口平移法(Nick Translation)DNA探针标记(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1. 按下表设置切口平移标记反应:
| 成分 | 用量 |
| 10×DNA聚合酶I缓冲液 | 2.5μl |
| 3 dNTP mixture,1mM each | 1.25μl |
| 标记核苷酸:非标记核苷酸混合(3:7,1mM) | 1μl |
| RNase-free DNase(0.002U/μL,见注) | 1μl |
| DNA聚合酶 I(10U/μL) | 0.5-1.5μl |
| 模板 DNA | 0.25μg |
| 加水到 | 25μl |
注:稀释 RNase-free DNase的缓冲液为1×DNA聚合酶 I缓冲液:50mM
2. 15℃放置 15-60分钟。
3. 加入10μl 50mM EDTA溶液。
4. 65℃放置 15分钟灭活酶。
5. 所得探针可以纯化后使用,也可以直接使用。
我公司的无RNase的DNase溶液促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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无RNase的DNase溶液促销关键词:RNase-Free DNase Solution,无RNase的DNase溶液,BTN90903
·Tricine-SDS PAGE上样液
编号:BTN81213
英文名称:Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer
规格:1mL
本产品是专门用于Tricine-SDS-PAGE电泳样品上样用的缓冲液,其浓度为2×,配胶时即开即用,非常方便。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·一站式miRNA柱式大提试剂盒
编号:BTN80906
英文名称:One-stop miRNA column large-scale extraction kit
规格:5次
本试剂盒是在柱式miRNA提取试剂盒(BTN80104)基础上自主开发的大提升级产品,是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。
试剂盒特点:
1.样品处理量大,一次最多可以处理2g的样品。
2.一步法直接分离纯化小RNA,比Ambion的两步法和PAGE电泳回收法更简单。整个过程只需要二十多分钟。
3. 得到的小RNA 长度大部分在200nt以下,包括 5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
4.小RNA 纯净,OD260/280一般都在1.9以上。无基因组DNA的污染。可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。
6.适用范围广,可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 溶液C | 100ml |
| 离心吸附柱(大提) | 10套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| RNA洗脱液 | 5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
由于离心吸附柱的吸附量限制,本产品每次提取只能处理2 g左右的各种组织,可以在50mL塑料离心管中操作。
1. 新鲜配制裂解液20mL。将溶液A和溶液B按 1:1的比例混合(即溶液A和溶液B各10mL),然后根据组织细胞类型的不同分为下面几种情况使用。注意:溶液A和溶液B混合后必须立即使用,不要放置,否则会产生沉淀。如果产生沉淀,需加热到65℃使其溶解后才能使用。
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,按每10 平方厘米细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,按每 1-5×106悬浮细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜的动物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中,每克组织加10mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/ mL 裂解液,否则十分容易产生DNA污染。
d)对新鲜的植物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
e)对 RNAhold 保存动物或植物组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,放入50mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
2. 将裂解物转移至一个干净的50mL塑料离心管中,然后加入0.2-0.3倍体积的自备*仿(1mL 裂解物需0.2-0.3mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000~15000g室温离心3~5分钟。
4. 将上清液(约12-16mL)转移到一个离心吸附柱(大提)中以去除大RNA。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下部分上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。本试剂盒提供的离心吸附柱(大提)之间没任何区别,可以随机选一个做大RNA 吸附,另一个做小RNA 吸附。
5. 12000~15000g室温离心离心吸附柱(大提)1分钟,收集管中的穿透液。大RNA 将与离心吸附柱的膜结合,小RNA 将存在于穿透液中。如果需要回收大RNA,请按附录的方法操作,但需要单独购买本公司的通用洗柱液和RNA 洗脱液。
6.在穿透液中加等体积的溶液C,混匀。此时溶液的总体积约30mL。
7. 分一次或分两次将混合液转移到新的离心吸附柱(大提)中,每次转移后需要12000~15000g室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液。
注意:不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱(大提)。
8. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中,12000~15000g室温离心1分钟,弃穿透液。
9. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
10. 12000~15000g室温离心1分钟以甩出残留液体。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 miRNA的使用。
11. 将离心吸附柱(大提)转移到一自备的、50mL RNase-free 收集管中,加入0.5-1mL RNA 洗脱液。
12. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的溶液即为miRNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
附录:
1. 用 10mL自备的通用洗柱液洗涤结合有大RNA的离心吸附柱(大提)。
2. 重复上步一次。
3.干甩一次。
4. 加入0.5-1mL RNA 洗脱液,室温放置2-3分钟。
5. 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的溶液即为大RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
无RNase的DNase溶液促销关键词:RNase-Free DNase Solution,无RNase的DNase溶液,BTN90903
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文献和实验Ribonuclease A (RNase A), DNase-free
FeatureThe RNase A is free of DNase activity. It is not necessary to heat it before use.DescriptionThe Ribonuclease A (RNase A) is an endoribonuclease that specifically degrades single-stranded RNA at C and U residues. It cleaves the phosphodiester
Preparation of RNase-Free DNase by Alkylation
with electrophoresis. DNase treatment makes the mixture more soluble, even if DNA degradation is only partial.
完整性分析。 二、基因组 DNA 的去除 某些情况下,痕量基因组 DNA(gDNA)可能与 RNA 共同被纯化。污染 gDNA 可能会干扰反转录结果,导致 RT-qPCR 等高灵敏度实验出现假阳性、高背景或检测率降低。 为去除 gDNA,通常在 RNA 分离过程中加入 DNase I。在进行 RT-(q)PCR 之前,必须完全去除 DNase I,因为任何残留的酶都会使单链 DNA(如引物和 cDNA)降解。通常,DNase I 失活(如,EDTA 和加热处理)或酶去除步骤会导致 RNA
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









