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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
12
- 生长状态:
贴壁细胞
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 英文名:
L929
中文名称:小鼠结缔组织L细胞株929克隆
简称:L929
细胞培养条件:MEM+10% FBS
生长特性:□ 贴壁 □悬浮 □半悬浮半贴壁
形态:上皮细胞样
来源:ATCC
是否通过STR鉴定:□是
背景资料:亲本L的亚克隆,是最早建立的连续培养物之一,L细胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下网眼状空隙和脂肪组织。APRT+,HPRT+。
本产品仅供科研!
L929小鼠结缔组织L细胞株929克隆使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验TNF包括TNFα与TNFß两型,它们具有极其相似的生物学活性,在体内外可对一些肿瘤细胞或细胞系起杀伤作用,而对正常细胞则无细胞毒效应。根据这一特点,可利用TNF对敏感靶细胞的细胞毒效应,在体外检测TNF的活性水平,既可检测分泌型TNF(sTNF),也可检测膜结合型TNF(mTNF)。最常用的方法是体外检测TNF对小鼠成纤维瘤细胞(L929细胞)的细胞毒效应。 一、基本原理 TNF对L929细胞有细胞毒作用,如同时加用转录抑制剂放线菌素D,则可提高L929细胞对TNF的敏感性10
1. 材料和试剂 1.1培养液A :DMEM培养液添加10%的胎牛血清(FBS)。 1.2培养液B:DMEM培养液添加10%的胎牛血清(FBS)和终浓度为0.7--1μg/ml 的放线菌素D。 1.3 L929细胞株:鼠结缔组织纤维母细胞,来源于22天雄性C3H鼠皮下组织。 1.4 结晶紫染色溶液:0。05%结晶紫 (50mg结晶紫加入20ml乙醇,加蒸馏水定容至100ml),蒸馏水稀释。 1.5 脱色液:(1)乙二醇独
1. 材料和试剂1.1培养液A :DMEM培养液添加10%的胎牛血清(FBS)。1.2培养液B:DMEM培养液添加10%的胎牛血清(FBS)和终浓度为0.7--1μg/ml的放线菌素D。1.3 L929细胞株:鼠结缔组织纤维母细胞,来源于22天雄性C3H鼠皮下组织。1.4 结晶紫染色溶液:0。05%结晶紫 (50mg结晶紫加入20ml乙醇,加蒸馏水定容至100ml),蒸馏水稀释。1.5 脱色液:(1)乙二醇独甲醚50%,蒸馏水稀释。(2)乙醇50%,乙酸0.01%(V/V),蒸馏
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