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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
12
- 生长状态:
悬浮细胞
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 英文名:
Raji
中文名称:Raji人Burkitt's淋巴瘤细胞
简称:U251 MG
细胞培养条件:RPMI-1640+10% FBS
生长特性:□ 贴壁 □悬浮 □半悬浮半贴壁
形态:淋巴母细胞
来源:ATCC
是否通过STR鉴定:□是
背景资料:Raji细胞由PulvertaftRJV于1963年从一位11岁黑人男孩的左上颌骨的Burkitt淋巴瘤中分离建立的,是第一个人类造血系统的连续传代细胞,为B细胞起源。该细胞中含有EBV,需要在二级生物安全柜中操作;可作转染宿主。
本产品仅供科研!
Raji人Burkitt's淋巴瘤细胞使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验细胞的生长抑制,利用裸鼠肿瘤模型测定二者的体内抑瘤活性。结果 pYZF1cd20和pYZcpp3的表达产物,经分离纯化获得具有CD20特异结合活性的Fab’和F(ab)2片段。体外活性实验证明Fab’和F(ab)2可以特异性的与CD20+B淋巴瘤细胞结合,能竞争性抑制HI47与CD20分子的结合,F(ab)2竞争性结合CD20分子的强度大于Fab’;均能抑制B淋巴细胞瘤增殖,而且F(ab)2抑制B淋巴细胞瘤增殖的能力高于Fab’,F(ab)2对Raji和Daud细胞的IC50(22.8μg/ml
因为抗体的结合而减少;在人体血清中无游离的CD20存在;最重要的是B淋巴细胞瘤上的CD20少有内吞和脱落的发生[ 2-5 ] 。1997年,以CD20为靶点的嵌合抗CD20单克隆抗体Rituxan已获准应用于B细胞淋巴瘤的治疗[ 6 ]。HI47(IgG3)是我所于1990年研制成功的国内第一个抗CD20鼠源性单克窿抗体,第四届国际人类白细胞分化抗原会议将HI47命名为CD20+X[ 7 ] 。我们利用噬菌体显示技术从HI47杂交瘤细胞中克隆到抗CD20抗体HI47可变区基因,将该基因构建成为嵌合的抗
[6]。以CD20作为治疗B淋巴细胞瘤的理想靶点具有很好的选择性。HI47(IgG3)是我所于1990年研制成功的国内第一个抗CD20鼠源性单克隆抗体,第四届国际人类白细胞分化抗原会议将HI47命名为CD20+X[7]。我们利用噬菌体显示技术克隆到HI47可变区基因,利用该基因构建了嵌合抗CD20 Fab片段,并在大肠杆菌中可溶性分泌表达[8],本研究旨在研究抗CD20 Fab抗肿瘤活性的机制。一、材料与方法1、材料PI为Sigma公司产品;3H-UdR购于中国原子能研究所;Raji细胞为我室所存,用含小牛
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