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2×pfu PCR MasterMix北京现货

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  • 百奥莱博
  • RFT093-KSG
  • 北京
  • 2025年07月12日
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    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃,避免反复冻融

    • 规格

      500μl|5×500μl

    特别提示:包括2×pfu PCR MasterMix在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:2×pfu PCR MasterMix
    产品货号:RFT093
    产品规格:500μl|5×500μl

    本品包含pfu DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂,浓度为2×。使用时,只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应,可zuì大限度的减少人为误差,具有快速简便、稳定性好等优点。用于高保真的DNA片段的扩增。使用该产品得到的PCR扩增产物为平滑末端,不可以直接用于TA克隆,要通过平滑末端克隆法进行克隆。以50μl PCR反应体系为例,每次使用25μl 2×MasterMix,500μl可做20次 50μl PCR反应。

    质量控制:以λDNA为模板,可以很好扩增5kb的DNA片段;以水稻基因组为模板,可以很好扩增3.2kb的DNA片段。

    使用方法;
    1、冰浴中彻底融化2×MasterMix,混匀后Minispin将溶液收集到管底。
    2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
      50μl反应体系 终浓度
    2×MasterMix 25μl
    上游引物 10μM 1-5μl 0.2-0.8μM
    下游引物 10μM 1-5μl 0.2-0.8μM
    模板 ×μl 10pg-1μg
    补至50μl  

    3. 快甩离心将反应液收集到管底。
    4、PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
    5、PCR仪上执行以下程序:
    步骤 温度 时间 循环数
    初始变性 94℃ 5 min 1
    变性 94℃ 30 sec 25-40*
    退火 Tm-5℃* 30 sec
    延伸 72℃ 0.5kb/min
    zuì后延伸 72℃ 5 min 1

    注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定zuì佳的反应条件(温度、时间等)。
    6、电泳检测。
    注:使用含染料的2×MasterMix可以直接上样;不含染料的2×MasterMix要与6×loading buffer混合后上样。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融。

    我公司销售的2×pfu PCR MasterMix北京现货,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。

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    • PCR 不必“摸条件”

      μL 体系 MasterMix 25 μL 上游 Primer ( 10 μM 1-5 μL 下游 Primer ( 10 μM ) 1-5 μL 模板 lamid DNA ~ 50 ng genomic DNA ~ 1000 ng cDNA ~ 500 ng 粗提液 ~ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例: 一、plasmid DNA 扩增 1.提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100,250,500

    • PCR 的这些小知识,您都知道吗?

      荷以加速引物和 DNA 模板复合物的形成。 通常情况下 Mg2+以 MgCl2 形式提供,但对于一些诸如 Pfu DNA聚合酶,Mg2+是以 MgSO4 形式提供,硫酸根在一些情况下可增强扩增能力。通常 Mg2+ 浓度在1-4 mM 范围,低 Mg2+ 浓度可导致无PCR产物或产物减少,高 Mg2+ 浓度可导致非特异性 PCR 产物生成。 【缓冲液】 PCR 反应缓冲液可为 DNA 聚合酶提供合适的化学环境。缓冲液的 PH 通常在 8.0-9.5 之间,一般是通过 Tris-HCl 来调节

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