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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
NCI-H1437
- 库存:
999
- 组织来源:
人
- 物种来源:
人
- 细胞形态:
贴壁
- 运输方式:
干冰
- 生长状态:
上皮细胞样
- 规格:
株
生物 Homo sapiens,人类 组织 肺;
源自转移部位:胸腔积液
产品格式 冻结的
特性 贴壁
疾病 第1阶段,腺癌; 非小细胞肺癌
年龄 60年
性别 男
种族 高加索
来源 肺结核胸腔积液转移于1986年6月建立。
临床资料 高加索人 男性 病人是个吸烟者。
60岁 七十年 评论 来自同一患者的淋巴母细胞系可作为ATCC CRL 5958。
传代培养 本协议中使用的体积为75厘米。二烧瓶;按比例减少或增加其它尺寸培养容器的离解介质的量。 去除和丢弃培养基。
简单地用Ca/Mg自由DulbCo磷酸盐缓冲盐水(D- PBS)或0.25%(W/V)胰蛋白酶-0.53毫米EDTA溶液冲洗细胞层,除去含有胰蛋白酶抑制剂的所有血清。
将2~3毫升胰蛋白酶EDTA溶液加入烧瓶中,倒置显微镜下观察细胞,直至细胞层分散(通常在5至15分钟内)。
为了避免结块,不要在击打或摇晃瓶子时搅拌细胞,等待细胞分离。难以分离的细胞可以放置在37°C以促进扩散。
添加6至8毫升的完整生长培养基和吸液细胞,轻轻吸管。 在新培养容器中加入适当的细胞悬液等分试样。 在37°C孵育培养物。
subcultivation比:1:2至1:6 媒体更新:每周两次 笔记有关细胞系酶解离和继代培养的更多信息,请参阅动物细胞培养的第13章:R. Ian Freshney的基本技术手册,第五版,由Wiley Liss,N.Y.,2005出版。
超低温保存 培养基,95%DMSO,5%
NCI-H1437 人肺癌细胞 ATCC
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文献和实验littleyan0418 我现在的任务是要构建人肺癌细胞的cDNA文库,但我不是这个方面科班出身,好多地方还不是很明白,想请教师兄师姐的经验,应该注意些什么。现在对总RNA的提取我有点找不出头绪。麻烦师兄师姐们可以给我分享些这方面的资料和网址吗?非常感谢!! neuronboy http://www.takara.com.cn/ 价格、试剂盒和说明书都有。呵呵 littleyan0418
我培养过不少肺癌细胞(人类),其中绝大部分都是贴壁细胞,具体如: (1) A549(肺腺癌) (2) NCIH446(小肺细胞癌) (3) 801(非小肺细胞癌) (4) NCIH460 (大细胞肺癌) 在消化传代过程中,步骤基本一致: 吸去旧的培养液->用Hanks'(1X)清洗一两次->加入一定量的消化液(Trpsin-EDTA)->置显微镜下观察,待细胞大部分变圆时,回到超静台->吸去消化液->加入一定量的新培养液->反复吹打细胞->再置显微镜下观察,直到细胞全部悬浮起来->
所需的D-HANK'S液和胰酶和用1640配置的适当浓度小牛血清最好都放在37度预热十分钟左右,让它们和细胞生长环境的温度是一样的。这样能达到既对细胞没有外来刺激的作用又能达到反应的最佳条件。我用的是小培养瓶,方法是:先把旧的培养液倒掉,用D-HANK'S大约3ml洗一次,加浓度为0.1%的胰酶进行消化,添加量只要能均匀的覆盖培养瓶底,大约要1.5ml,最好把瓶盖旋紧放到37度培养箱里培养3-5分钟,在显微镜下观察细胞收缩,变圆,加入3ml的10%的血清终止消化。小心仔细的吹打培养瓶底使细胞
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