raji 人Burkitt's淋巴瘤细胞

嵌合抗CD20 Fab诱导Raji细胞凋亡

[6]。以CD20作为治疗B淋巴细胞瘤的理想靶点具有很好的选择性。HI47（IgG3）是我所于1990年研制成功的国内第一个抗CD20鼠源性单克隆抗体，第四届国际人类白细胞分化抗原会议将HI47命名为CD20+X[7]。我们利用噬菌体显示技术克隆到HI47可变区基因，利用该基因构建了嵌合抗CD20 Fab片段，并在大肠杆菌中可溶性分泌表达[8]，本研究旨在研究抗CD20 Fab抗肿瘤活性的机制。一、材料与方法1、材料PI为Sigma公司产品；3H-UdR购于中国原子能研究所；Raji细胞为我室所存，用含小牛

嵌合抗CD20Fab’抗体片段诱导Raji 细胞的凋亡机制

因为抗体的结合而减少；在人体血清中无游离的CD20存在；最重要的是B淋巴细胞瘤上的CD20少有内吞和脱落的发生[ 2-5 ] 。1997年，以CD20为靶点的嵌合抗CD20单克隆抗体Rituxan已获准应用于B细胞淋巴瘤的治疗[ 6 ]。HI47（IgG3）是我所于1990年研制成功的国内第一个抗CD20鼠源性单克窿抗体，第四届国际人类白细胞分化抗原会议将HI47命名为CD20+X[ 7 ] 。我们利用噬菌体显示技术从HI47杂交瘤细胞中克隆到抗CD20抗体HI47可变区基因，将该基因构建成为嵌合的抗

抑制B淋巴细胞瘤生长的嵌合抗CD20基因工程抗体

细胞的生长抑制，利用裸鼠肿瘤模型测定二者的体内抑瘤活性。结果 pYZF1cd20和pYZcpp3的表达产物，经分离纯化获得具有CD20特异结合活性的Fab’和F（ab）2片段。体外活性实验证明Fab’和F（ab）2可以特异性的与CD20+B淋巴瘤细胞结合，能竞争性抑制HI47与CD20分子的结合，F（ab）2竞争性结合CD20分子的强度大于Fab’；均能抑制B淋巴细胞瘤增殖，而且F（ab）2抑制B淋巴细胞瘤增殖的能力高于Fab’，F（ab）2对Raji和Daud细胞的IC50（22.8μg/ml