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大肠杆菌DH5α菌种价格

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  • BTN12-11y-TRC
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  • 2025年07月11日
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    • 细胞类型

      大肠杆菌

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 库存

      371

    • 英文名

      E.coli DH5α Strain

    • 运输方式

      干冰运输

    • 规格

      1 mL

    特别提示:包括大肠杆菌DH5α菌种在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:大肠杆菌DH5α菌种
    英文名称:E.coli DH5α Strain
    产品货号:BTN12-11y
    产品规格:1 mL

    本菌种是美国科学家D.Hanahan在1983年首次报道的K-12系大肠杆菌菌株,它是以DH1为基础构建的,是分子生物学中zuì常用的用于克隆的大肠杆菌菌株。

    产品特点:
    1.转化效率比DH1更高,适用于分子克隆。
    2.脱氧核糖组成型合成,适合扩增制备高拷贝和大型质粒。
    3.携带?-半乳糖苷酶?片段,如果外源基因携带此酶的?片段,则可以进行蓝白斑筛选重组子。
    4.内源核酸酶EndA1缺失,提取的质粒DNA残留DNase少,质量高。
    5.基于RecA的三套重组系统均缺失,质粒在复制过程发生重组、丢失和串环的可能性降到zuì低,使得插入片段稳定。
    6.EcoK限制功能缺失(hsdR-),不能酶切在EcoK位点没有甲基化的DNA,但其修饰功能完整,故可以用EcoK位点非甲基化质粒通过本菌株制备其对应的甲基化质粒,后者可用来转化限制EcoK功能正常(基因型为hsdR+)的K-12系的大肠杆菌。
    7.本菌株对常见抗菌素没有抗性。

    基因型:
    大肠杆菌DH5菌种的基因型是:K-12,F-,φ80,-,Δ(argF-lac)169,lacZ58(M15),ΔphoA8,glnX44(AS),deoR481,rfbC1,gyrA96(NalR),recA1,endA1,thiE1,hsdR17(各文献上报道的基因型稍微有所不同,此处采用美国耶鲁大学Coli Genetic Stock Center的资料)。

    大肠杆菌DH5菌种基因型符号及其含义列表如下:
    基因型 表现型
    K-12 K-12系的所有菌种默认都携带F因子和λ、e14、rac三种原噬菌体。其中的e14携带野生型mcrA基因,其产物可对甲基化的CG切割。
    F- 此菌株缺失F因子
    λ- 此菌株缺失λ原噬菌体
    φ80 携带φ80原噬菌体
    Δ(argF-lacZ)U169 也叫ΔlacU169,来于Hfr3000U169菌种,位于此区域的lac操纵子和过氧化氢敏感基因缺失,使细菌抗过氧化氢,实际缺失mmuP到argF和lac到mhpD的区域,实为Δ(mmuP-mphD)
    rfbC1 LPS合成缺失,缺失LPS有助于提高转化效率
    deoR481 deo操纵子阻遏蛋白失活,脱氧核糖组成型合成,适合扩增制备质粒
    endA1 核酸内切酶I缺失
    glnX44(Am) 同supE和 glnV,使琥珀终止子编码谷氨酰胺,为部分噬菌体生长所需
    gyrA96 DNA促旋酶失活,导致对萘啶酮酸和荧光喹lín的抗性
    hsdR17 EcoK系统的限制性内切酶Eco失活,不酶切非甲基化的Eco位点
    ΔlacZ58M15 原ΔlacZM15,携带来于M15菌株的、编码β-半乳糖苷酶的ω片段,与编码β-半乳糖苷酶α片段的质粒互补可,恢复酶活性,用于蓝白斑筛选
    recA1 ATP依赖型重组酶失活,recBCD、recE和 recF三条重组路径均复丧失,重组率降低1万倍。适合扩增有回文结构的高拷贝质粒
    thiE1 原thi-1,不能合成硫氨(维生素B1)


    保存条件:-80℃,有效期一年。

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    • 大肠杆菌感受态细胞制备及外源DNA的转化

      苄青霉素的平板培养基上培养,只有转化体才能存活,而未受转化的受体细胞则因无抵抗氨苄青霉素的能力而死亡。影响转化率的因素细胞生长状态和密度。转化的质粒 DNA 的质量和浓度。试剂的质量。防止杂菌和其它外源 DNA 的污染。离心设备 实验试剂 大肠杆菌DH5α LB培养基, 0.1mol/LCaCl2溶液(预冷) 氨苄青霉素 pUC18质粒 实验步骤 菌株活化: 1.用接种环直接取冻存的大肠杆菌DH5α,在LB培养基平板表面划线,于37℃培养16小时 2.挑取一个单菌落,转到3-

    • 实验操作篇

      臂区域如果 GC 含量过高过低,或者有重复序列,都可能在核酸外切酶切割后形成发卡结构,影响重组效率,可以使用质粒设计软件来检查同源重组臂的设计。 ⑤插入序列本身的问题:有些序列本身存在连接载体困难、连接产物不稳定、连接产物在大肠杆菌中复制困难等问题。对于这类序列可以考虑将序列打断后分步构建,或者更换载体或感受态的方式尝试解决。   2. 质粒提取量不足   质粒提取量少常见的原因可能是: ①摇菌时间过长:大肠杆菌生长已经超过对数期,细菌老化,导致细胞和 DNA 降解。 ②摇菌时间不足:细菌生长不充分

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