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36
- 英文名:
Active Protein Kinase, cGMP Dependent Type II (PRKG2)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
10ug-5mg
英文名称:Active Protein Kinase, cGMP Dependent Type II (PRKG2)
规格:10ug/50ug/200ug/1mg/5mg
物种:Homo sapiens (Human,人)
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
等电点:8.9
纯度:>90%
应用:Cell culture; Activity Assays.
用法:Reconstitute in 20mM Tris, 150mM NaCl (pH8.0) to a concentration of 0.1-1.0 mg/mL. Do not vortex.
储存:2-8°C不超过一个月,-80°C不超过12个月。避免反复冻融。
稳定性:热稳定性以损失率显示。损失率是由加速降解试验决定,具体方法如下:在37°C孵育48小时,没有显著的降解或者沉淀产生。保质期内,在适当的条件下存储,损失率低于5%。
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文献和实验很多新手在问做原核表达需要考虑的载体和菌株的选择,现系统地解答一下,供新手借鉴。
影响。在这些情况下,常可用有效表达的氨基末端序列构建融合蛋白,然后在纯化后用位点特异性蛋白酶消化去除融合序列。 LIC (连接非依赖的克隆)策略对这种方法特别有用,因为克隆操作通过肠激酶和因子 Xa 能够去除所有氨基端载体编码序列。 由于限制性位点和读码框相容性的需要,克隆策略也会影响载体选择。由于许多 pET 载体具有共同的限制性位点配置,通常可能将一次制备的目标基因克隆到几个载体中。采 PCR 克隆策略时则有不同的考虑。 LIC 载体试剂盒推荐用于此目的,可通过 PCR 制备插入
只有一种ERK1或ERK2的高度活化形式(双重磷酸化)存在,比非磷酸化ERK活性高出1000倍还多。任何时候细胞中都存在三种未完全活化的ERK,一种以未被磷酸化的酶形式存在,另两种是单磷酸化的酶,即只含有一个磷酸化的丝氨酸或酪氨酸残基。 JNK/SAPK (c-Jun氨基末端激酶/应激激活性蛋白激酶)级联系统会由于紫外线照射、热休克或炎症刺激而被激活。这一类MAPK反应受Rac和Cdc42两类小G蛋白的调节。活化的Cdc42结合PAK65蛋白并激活
融合蛋白,然后在纯化后用位点特异性蛋白酶消化去除融合序列。 LIC (连接非依赖的克隆)策略对这种方法特别有用,因为克隆操作通过肠激酶和因子 Xa 能够去除所有氨基端载体编码序列。 由于限制性位点和读码框相容性的需要,克隆策略也会影响载体选择。由于许多 pET 载体具有共同的限制性位点配置,通常可能将一次制备的目标基因克隆到几个载体中。采 PCR 克隆策略时则有不同的考虑。 LIC 载体试剂盒推荐用于此目的,可通过 PCR 制备插入片段,而不需要限制性消化载体或插入片段。
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