脱色摇床

关于混匀、摇床常见问题

1、摇床的安全转速保护是什么意思？超过设定转速和最高转速时，仪器都会停止，重启瞬间按住时间按钮旋转转速按钮   2、摇床是可以用在 CO2 培养箱中吗？ 可以，但是得看培养箱设置环境，可能会影响使用寿命,湿度最好不要超过 80%   3、混匀仪的偏心距是多少？ 偏心距和周转直径是一样的   4、DLAB 的哪款摇床属于脱色摇床？ DLAB 全系列摇床均可以做脱色反应，但应用最多的是翘板摇床（-R 系列）。

操作篇：western blot 之封闭及杂交

封闭及杂交 在做杂交时，个人建议：还是使用杂交袋进行一抗和二抗的孵育，这样节约抗体。 操作开始： 1. 将膜用 TTBS 从下向上浸湿后，移至含有封闭液的平皿中，室温下脱色摇床上摇动封闭 1 h。必要时可先用丽春红染色（2%乙酸，0.5%丽春红的水溶液）观察蛋白条带，再用去离子水和 TTBS 将丽春红洗脱后封闭，如用蛋白 marker 则可省略此步。 2. 将一抗用 PBST 稀释至适当浓度（在 1.5 ml 离心管中）；撕下适当大小的一块儿保鲜膜铺于实验

免疫印迹实验相关原理介绍

样品。 跑胶：浓缩胶推荐用 80 伏电压，待样品进入分离胶后，可用 120-180 伏电压。 跑胶完成以后，需先将胶上无样品的多余部分切除，滤纸和海绵需要预先润湿。 分离的蛋白转移至膜载体上 选择合适的膜 转膜：以 NC 膜为例 提前十分钟到半小时用转膜 Buffer 润洗 NC 膜 按照以下的结构来安装转膜体系：负极-海绵-三层滤纸-胶-膜-三层滤纸-海绵-正极。 转膜，一般为 2 小时。 转完后将膜用1×丽春红染液染 5 min（于脱色摇床上摇）。然后用水冲洗掉没染上的染液就可看到膜上的蛋白。将膜