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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
263
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
人周期素依赖性激酶1(CDK1)ELISA试剂盒保养小妙招
ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附反应进行实验,来检测特定物质的试剂盒。试剂盒中会有不同浓度的标准样品,在酶标条中通过固相的抗原或抗体,酶标记的抗原或抗体,酶作用的底物反应。
可形成标准曲线从而进行试验样品的测定,检测不同的物质有对应不同的试剂盒。
人周期素依赖性激酶1(CDK1)ELISA试剂盒的处理和保存:
★ 要注意避免出现严重溶血,血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。
★ 样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染:
① 细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;
② 一些细菌的内源性酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。
★ 血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。
★ 冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。
★ 标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。
★ 至今我们拥有了一支由销售、技术服务、售后服务等人员构成的试剂盒精英团队,随时为中国客户提供的服务!
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文献和实验只在siRNA靶向DONSON处理的细胞中下调80%。 在GDF3转染的细胞中,周期素E2只有轻微改变。 如果我们对在相同样品中上调的基因进行分析,那么在两个样品中上调最强烈的是p21,也被称为周期素依赖的激酶抑制剂1a。 当与转染siGFP的对照细胞相比时,p21在GDF3和DONSON siRNA转染细胞中分别上调1.81-3.31倍(图4)。 图4:细胞周期基因表达水平的变化。显示了在RealTime ready细胞周期检测预制板中检测的所选基因表达水平(周期素和周期素依赖的激酶
成熟促进因子(maturation promoting factor,MPF)
能够促使染色体凝集,使细胞由G2期进入M期的因子。在结构上,它是一种复合物,由周期蛋白依赖性蛋白激酶(Cdk)和G2期周期蛋白组成,其中,周期蛋白对蛋白激酶起激活作用,周期蛋白依赖性蛋白激酶是催化亚基, 它能够将磷酸基团从ATP转移到特定底物的丝氨酸和苏氨酸残基上。酵母细胞周期中只有一种Cdk,而哺乳动物的细胞周期中有多种Cdk,所以哺乳动物的MPF是由Cdk1和周期蛋白B组成的复合物。
一套协调的分泌性蛋白,其信号的调节取决于细胞因子依赖性的细胞间的交流,也是药物开发的重要依据之一。分泌蛋白的分析最好是通过同时检测多种蛋白来实现,因为可以最大限度地提高数据的背景和相关价值。而传统ELISA“单端点”读数模式存在一定局限性,而基于微珠的ELISA又涉及多个清洗步骤,限制自动化分析能力,耗时费力。 方案:此案例中我们介绍一个使用iQue®3和Multicyt® Qbeads Plexscreen试剂盒分析PBMCs中细胞因子分泌的案例。实验将来自单一供体的冻存PBMC 进行解冻
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