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8 次分离反应
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polyA Spin 试剂盒组份
– 洗涤缓冲液、洗脱缓冲液、糖原、NaCl 和 NaOAc
概述
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文献和实验to precipitate as long as desired (up to overnight)。 To proceed, spin sample in a 4 !C microfuge at max speed for 30 minutes to 1 hour. 12. Aspirate off supernatant and wash pellet with 250 L 70% EtOH and spin down 5 . polyA RNA Isolation 13. Aspirate
1、实验目的提取人体细胞的总RNA和mRNA。2、本实验所需试剂1)、CNE-2细胞及培养细胞的一系列条件,2)、PBS缓冲液, TRIZOL试剂,3)、DEPC处理过的水、大、中、小Tip及1.5 ml EP管,4)、新的氯仿、异丙醇和乙醇,5)、mRNA分离试剂盒:Oligotex mRNA Mini Kit,Cat.no.:70022, QIAGEN。6)、新配的电泳缓冲液,专跑RNA的琼脂糖(Agarose)。3、实验流程3.1 细胞总RNA的提取1)、6孔板细胞(CNE-2)汇合
Kit提供了一个快速而简单,基于细胞分析的RNAi分析方法,可以鉴别多达5个基因。你不需要知道进行阻断的最佳siRNA靶序列。只需要从作为BLOCK-iT™ Dicer反应模板的dsRNA开始,按照优化步骤,加入高活性的Dicer酶,以获得来自于长dsRNA的d-siRNA库。然后,通过柱(spin column)纯化产生高纯度的d-siRNA库,接着,使用Lipofectamine™ 2000 试剂有效地转染细胞。最终,通过使用BLOCK-iT™ Dicer Kits高水平特异地阻断基因(图
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