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LB Agar plate (with 100μg/ml Ampicillin)
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20
- 供应商:
上海吉至生化科技有限公司
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无
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BR,10个/包
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文献和实验含Amp的LB平板上,划线接种要防止划破培养基,划线方法如图所示: 第一次划线后接种环灼烧 第二次划线起点与第一次 如此在平板上 再进行第二次划线 划线交*,接种环灼烧后再 划线5-6次 进行第三次划线 4. 接种完成后将培养皿倒置入培养箱37℃培养过夜,运用这种划线方法接种,可以较好地保证单菌落的形成。 5. 比较
: 1.取适量连接产物加到分装的200 μL感受态细胞中,冰上混匀,冰浴30min;此过程中,需倒含氨苄的LB平板。 2.42℃热激90s,迅速在冰浴中冷3-5min; 3.上述管中加入600μL LB培养基,于37℃振荡培养45min;此过程中,在LB平板上涂布X-Gal 40 μL和IPTG 20 μL 。 4.取适量菌液涂布LB平板(含Amp 50μg/ml),室温涂布均匀后(至菌液完全被吸干),于37℃倒置,过夜
保存 外源DNA的转化: 9.取目的DNA加入大肠杆菌感受态细胞中,于冰上放置30min 10.于42℃水浴90S 11.冰上放置2min 12.加入800μlLB液体培养基于37培养1小时 13.将培养液均匀涂布在含Amp 的培养基平板上 14.将平板放置于37℃恒温培养箱中培养12-14个小时,然后观察结果 对照组 对照组1: 以同体积的无菌双蒸水代替DNA溶液,其它操作与上面相同。此组正常情况下在含抗生素的LB平板上应没有菌落出现。 对照组2: 以同体积的无菌双蒸水代替DNA溶液
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