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- 英文名:
5-Bromo-4-hydroxy-6-methylpyrimidine
- 库存:
20
- 供应商:
上海吉至生化科技有限公司
- CAS号:
3438-52-6
- 规格:
,250mg
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文献和实验[原理] DNA是通过异羟基洋地黄毒苷(digoxigenin,Dig)配基标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(dUTP)随机插入结合而被标记。dUTP通过间臂连结类固醇半抗原异羟基洋地黄毒苷酸基,形成Dig-dUTP,杂交反应后,杂交的靶DNA通过酶联免疫法与一个抗体复合物[抗异羟基洋地黄毒苷配基碱性磷酸酶复合物(Dig)Ap]结合,接着在5-溴-4氯-3-吲哚磷酸盐(X-磷酸盐)和硝基四氮唑蓝(NBT)存在下,由酶催化反应,在杂交部位形成蓝紫色带或颗粒。 [操作] 1.转移 通过打点吸渍
和细胞的活力成正比三、羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)检测法羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)是一种可穿透细胞膜的荧光染料,具有与细胞特异性结合的琥珀酰亚胺脂基团和具有非酶促水解作用的羟基荧光素二醋酸盐基团,使C E成为一种良好的细胞标记物。CFSE进入细胞后可以不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。当细胞分裂时,CFsE标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半。这样,在一个增殖的细胞群中,各连续代细胞的荧光强度呈对递减,利用流式细胞仪在488nm
一、目的与意义 学习使用大肠杆菌感受态细胞导入外源DNA,使学生掌握DNA分子进入细胞的原理和实验操作技术; 掌握PCR法快速鉴定重组载体的基本操作。 二、实验原理 转化是指将质粒DNA或构建的重组子导入细胞的过程。细菌细胞在低温,低渗(CaCl2溶液)中膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成了抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面。经42℃短时间热激处理后,促进了细胞吸收DNA复合物。重组质粒转化宿主
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