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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
177
- 英文名:
Ni-IDA-Beadose Resin Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏(2-8℃)
- 规格:
1盒
特别提示:包括His标签蛋白纯化试剂盒(Ni-IDA)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:His标签蛋白纯化试剂盒(Ni-IDA)
英文名称:Ni-IDA-Beadose Resin Kit
产品货号:GS4622
产品规格:1盒
储存条件:冷藏(2-8℃)
概述
主要用于纯化带有组氨酸标签(6×His标签)的重组蛋白。本产品以进口优质的6%交联琼脂糖为基质,通过化学方法将亚氨基二乙酸(iminodicitic acid,IDA)分子固定于琼脂糖表面羟基,再由IDA络合金属Ni2+而制成。纯化原理是基于重组蛋白组氨酸标签的咪唑环可与过渡态金属Ni2+离子形成稳定的化学配位键,因此能特异、牢固、可逆地吸附于固定有这些金属离子的琼脂糖基质。
特点
- 与四价金属离子螯合剂氮川三乙酸制成的Ni-NTA-琼脂糖相比,Ni-IDA-琼脂糖与目标蛋白结合的能力更强,柱容量更大;
- 在高浓度变性剂(8M尿素、6M盐酸胍)中性能稳定,可直接用于包涵体蛋白的分离纯化;
- 支持变性包涵体蛋白的柱上复性,起到分离、复性同步进行的效果;
- 可以反复使用和再生3~5次。
组份
10 PK 1ml预装重力柱及1瓶500 ml结合/清洗缓冲液和1瓶500 ml洗脱缓冲液
技术规格
| 基质 | 带有Ni2+高度交联的6%琼脂糖 |
| 平均颗粒大小 | 90μm |
| 动态结合载量 | 10%临界载量,150cm/h,大约6~10mg组氨酸便签蛋白质/ml填料; |
| 金属离子载量 | 大约15 μmol Ni^2+/ml填料 |
| 推荐流速 | <150cm/h |
| 化学稳定性 | 40℃放置一周,0.01 M HCl、0.1 M NaOH 12h,1 M NaOH、70%乙酸30min,30%2-异丙chún1 h,2%SDS |
| pH稳定性 | 3~12(工作) |
| CIP稳定性 | 2~14(短期) |
| zuì大压力 | 1 bar(100 KPa) |
| 包装规格 | 含10支1ml预装重力柱及500 ml装的Wash buffer和Elution buffer |
我公司销售的His标签蛋白纯化试剂盒(Ni-IDA),质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验-HCl, pH8.5。DNA 洗脱溶液,室温密闭贮存。二、简介总RNA 和基因组DNA 同步纯化试剂盒是为从生物样品中同步纯化总RNA 和基因组DNA 设计的,可从≤1×107 动物细胞、100mg 动物组织或5×107 酵母菌中提取多至150μg RNA 和20μg DNA。本试剂盒采用全新的相分离技术分离、纯化RNA 和DNA,结合silica 膜选择性吸附DNA 的原理,达到快速、同步纯化RNA 和基因组DNA 的目的。本试剂盒纯化的总RNA 分子完整、纯度高,适合用于NorthernBlot、RT
离子浓度、添加剂(如5%甘油、1mM DTT)等。 原因三 His标签没有表达或丢失或暴露不充分。 建议1 用anti-His的抗体进行WB,检测His标签是否存在。 建议2 将蛋白用4-6M盐酸胍或4-8M尿素变性后,让His标签充分暴露出来,看是否能与填料结合。 建议3 改变His标签的位置或者增加其数目(常用6-12个His),增加暴露和结合机会。 建议4 改变金属结合离子,除了Ni2+,Cu2+、Zn2+、Co2+也可以用来进行His标签的捕获。 2、His标签蛋白结合了,但是洗脱不充分 原因
Purification of 6xHis epitope tagged proteins by Ni-NTA-Agarose His标签蛋白纯化
Low (“Low”)Imidazole Buffer 0.5L 100mM Imidizole 3.4g 5% glycerol 25ml 100% glycerol 50mM Tris-HCl (pH 7.9)50ml 0.5M Tris-HCl (pH 7.9) 0.1% Tween-20 0.5M 100% Tween-20 500mM NaCl50ml 5M NaCl dH2O Fill to 0.5L (start w/ 350ml) High (“High
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