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- 文献和实验
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999
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10×96 T
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文献和实验在保存的过程中会失活、降解,反复冻融也会造成问题。这就要求预先拟定好刺激物的保存计划,时隔三个月或者半年就要做一次验证性的实验。相关内容参见第四节。 目前市场上的ELISPOT试剂盒都是来自国际知名的公司,不同公司的试剂盒采用的抗体质量都是有保证的。但是大家往往忽略了抗体之外的其他成分,比如封闭液、抗体稀释液等等。这些也辅助试剂会造成显著的差别。在追求实验结果的重复性与可信度的时候,必须引起重视。 血清与内毒素当然是一个重要影响因素,为了实现ELISPOT标准化,提高实验的可
。做重要实验的时候,最好让两个人独立稀释和计数,结果相差要控制到10%以内。 4、刺激物、试剂盒与血清 实验要取得重复性,刺激物的刺激效果必须要可重复、可再现。一批刺激物用完之后,换下一批刺激物的时候,要做验证性试验。另外,有些多肽、蛋白类的刺激物可能在保存的过程中会失活、降解,反复冻融也会造成问题。这就要求预先拟定好刺激物的保存计划,时隔三个月或者半年就要做一次验证性的实验。相关内容参见第四节。 目前市场上的ELISPOT试剂盒都是来自国际知名的公司,不同公司的试剂盒采用的抗体
关于ELISPOT试剂盒: 用Mabteck公司的ALP标记抗体吧,配合Millipore公司的Multiscreen-IP 96孔板,所有的试剂都可以减半,照样可以出非常好的结果,4*96孔的试剂盒我一直做8*96孔,但BCIP/NBT显色液没试过减半,因为它很便宜。记得当年第一次做实验就出了很好的结果,经过不断摸索,做出的蓝紫色斑点确实非常漂亮,几乎没有非特异斑点,嗯,ELISPOT是我最拿手的实验之一。 关于PBMC: 拿到血液标本后,首先我要做的是尽快分离PBMC(一般2h
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