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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
269
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
人CUB带状疮疹透明区样域蛋白1(CUZD1)ELISA试剂盒实验时结果失败可能的原因是:
a) 水质被金属离子等污染,防止办法尽量使用新鲜水或蒸馏水。
b) 洗涤不充分,样品中其它成分残留或酶残留,防止办法洗涤液应注满微孔,充分洗涤。
c) 移液头重复使用,未洗净或消毒不完全,防止办法移液头一次性使用。
d) 酶标板灵敏度过高。
e) 一抗显色时间的控制等等,关于ELISA的每一步都要注意才行。
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文献和实验量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封闭剂使用,但由于奶粉的成份复杂,而且封闭后的载体不易长期保存,因此在试剂盒的制备中较少应用。封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。并非所有的ELISA固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封闭剂的作用。但在间接法测定中,封闭一般是不可少的(见2.2.2)。包被好的
)离心10分钟。【如果希望分离DNA或蛋白质,保留中层和下层酚-氯仿相,有机相能保存在4°C一夜】 4. 弃去上清液(RNA沉淀为一层如凝胶样透明的小块附在管底和管壁),按每1 ml Trizol液加入至少1 ml的比例加入75%乙醇进行洗涤,涡旋混匀,4 ℃下7 500 g离心5分钟【RNA能够在-20 °C保存在75%乙醇中至少1年,4°C保存至少1周】 5. 小心弃去上清液,让沉淀的RNA在室温下自然干燥或真空干燥5-10分钟,注意不要干燥过分,否则会使RNA失去溶解性,导致
相中,水相的体积约相当于所加的Trizol试剂量的60%。 (4) 仔细吸取上层水相,移至另一EP管中。 (5) 加0.5ml异丙醇,以沉淀RNA(每1ml Trizol试剂加入0.5ml异丙醇),置室温10min。 (6) 4℃离心,10000g×10min。RNA沉淀为一层如凝胶样透明的小块附在管底和管壁。 (7) 弃上清液,加入预冷的75%乙醇1ml(每1ml Trizol试剂加入75%乙醇至少1ml),震荡,充分洗涤沉淀,4℃离心,5500g×5min。弃上清液,空气干燥(或真空
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