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植物核糖体蛋白提取试剂盒

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      BestBio贝博生物

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      50T

    贝博® BBproExtra® 植物核糖体提取试剂盒用简便快速的方法即可快速提取得到植物核糖体。 本试剂盒适用于提取新鲜植物叶片样本的核糖体,用于冻存样本的提取时核糖体回收率较低。 贝博® BBproExtra® 核糖体提取试剂盒提取的核糖体具有生物活性,可以用于核糖体功能研究、核糖体蛋白提取等各种下游应用。 本试剂盒采用非酶法的快速提取方法,可以在一小时内快速提取得到核糖体,但是回收率比酶法核糖体提取试剂盒稍低。需要酶法提取试剂盒可以联系贝博选择其他货号的试剂盒(相关产品BB-36064),酶法提取得到的核糖体回收率会有增加,但是耗时较长。请根据不同的需要选择试剂盒。 本试剂盒提取得到的为真核型的核糖体,需要叶绿体线粒体等原核型核糖体提取的请选择贝博其它货号的试剂盒(相关产品BB-36065)。

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    1. 提取液准备:
    每200 μl冷的总蛋白提取液中加入1 μl蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
    2. 取500 mg-1 g新鲜植物样本叶片,洗净擦干后去除叶梗和粗脉。用手术剪刀尽可能剪碎。
    3. 加入2 ml 试剂A,用匀浆机/匀浆器/组织搅碎机充分匀浆。
    4. 将匀浆液用100 μm细胞筛过滤。
    5. 将滤液在500×g条件下离心5分钟,弃沉淀,收集上清。
    6. 将上清在1000×g条件下离心10分钟,弃沉淀,收集上清。
    7. 在上清中加入0.5 ml提取液B,充分混匀。
    8. 置振荡器振荡20分钟。
    9. 在2000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
    10. 将上清在5000×g力离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
    11. 将上清在10000×g力离心10分钟。弃沉淀,收集上清。
    12. 将上清在4℃,100000×g力条件下离心60分钟。弃上清,收集沉淀。
    13. 弃上清,在沉淀中加入100μl核糖体蛋白提取液C,充分混匀。
    14. 在4℃条件下振荡20-30分钟。
    15. 在4℃,10000×g条件下离心5分钟。
    16. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到核糖体蛋白。
    17. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

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