- ¥1490
- 联迈生物
- LM13-5170
- 中国/上海
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Xanthomonas oryzae pv.oryzae
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
50次
中文名称：水稻黄单胞菌PCR试剂盒
英文名称：Xanthomonas oryzae pv.oryzae
规格：50次
运输：低温
保存：-20度
有效期：一年
货期：一周
产品及特点
1.即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
2.荧光定量 PCR 检测，反应特异性强。
3.提供阳性对照，便于分析实验结果。
4.PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳，本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
使用方法
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 stn 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
1.标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2.用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
3.先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
1.在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
2.换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5 拷贝/μL 的阳性对照。
3.换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。
4.NC 管中不加任何阳性对照。
5.从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值， 并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
一．PCR 检测（20 μL 体系）
1.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次）
注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照，其他荧光 PCR 仪器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX。
建议 PCR 反应参数（具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化）
3. 数据采集
按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm， 最大发射光谱在 530 nm。
四、数据处理
以 stn 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
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文献和实验摘要： DNA芯片技术是近年迅速发展的一门生物高新技术，其突出特点在于高度并行性、多样性，即能一次性对生物遗传信息进行大规模的快速、同步分析。DNA芯片技术目前已用于基因重复测序、基因表达分析、新基因的发现、基因单核苷酸多态性（SNPs）研究、基因诊断、药物筛选等领域，而且其应用范围还在不断扩展。本室运用这一新技术，检测水稻在受水稻黄单胞菌水稻致病变种及该菌株的rpfC基因缺失突变体感染时基因表达的差异，发现一些基因可能与水稻抗白叶枯病相关。 近年来，兴起了一股DNA芯片技术的热潮，它以其
【分享】Thermo Scientific 直接PCR（植物、动物、人源组织）
直接PCR方法使PCR可以直接从样本开始，为DNA扩增带来前所未有的便捷。未经DNA纯化而直接使用微量原始样本做模板，为PCR实验节省大量的时间和成本。 优势： 无需进行昂贵又费时的DNA抽提； 样品需求量小； 实验方案简便，手动操作步骤少； 实验时间极短； 已对多种样本类型进行测试； 强劲的热启动DNA聚合酶保证特异性和高产量。 适用于各类植物样本的高效PCR 测试样本：叶片（拟南芥、玉米、水稻、棉花、烟草、葡萄藤） 种子（苹果、胡萝卜、南瓜） 真菌和藓类（稻瘟
成果发表在近日的《Molecular Therapy》杂志上。参与本项研究的单位还有复旦大学公共卫生应用中心及复旦大学医学微生物学和生物医学科学研究所。本研究工作得到了国家重点基础研究发展计划（973计划）项目基金及国家科技重大专项基金的经费支持。 背景介绍： TALEN 技术（Transcription activator–like effector Nuclease）是一种新的定点基因修饰技术，是基于植物病原体黄单胞菌( Xanthomonas)分泌的一种转录激活子样效应
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