- ¥1490
- 联迈生物
- LM13-4490
- 中国/上海
- 2025年12月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Thecaphora solani
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
50次
中文名称：马铃薯黑粉病菌PCR试剂盒
英文名称：Thecaphora solani
规格：50次
运输：低温
保存：-20度
有效期：一年
货期：一周
产品及特点
1.即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
2.荧光定量 PCR 检测，反应特异性强。
3.提供阳性对照，便于分析实验结果。
4.PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳，本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
使用方法
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 stn 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
1.标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2.用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
3.先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
1.在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
2.换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5 拷贝/μL 的阳性对照。
3.换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。
4.NC 管中不加任何阳性对照。
5.从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值， 并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
一．PCR 检测（20 μL 体系）
1.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次）
注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照，其他荧光 PCR 仪器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX。
建议 PCR 反应参数（具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化）
3. 数据采集
按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm， 最大发射光谱在 530 nm。
四、数据处理
以 stn 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
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文献和实验禾本科最多。病菌侵染寄主组织可形成肿大、瘿瘤或斑点等症状。形成大量具有厚壁的厚垣孢子，呈黑粉状。厚垣孢子为冬孢子，次春萌发产生分隔担子，其上顶生或侧生担孢子。引起多种黑粉病，如小麦腥黑粉病、玉米黑粉病，危害严重。 银耳属 （Tremella） 属于银耳目。担子果胶质，无柄，分瓣，卷曲成花朵状，纯白或微黄，半透明。担子有隔，深埋于担子果表层的子实层内。大多腐生，分布普遍。银耳（T.fuciformis）为滋补食品，已普遍人工培养。 木耳属 （Auricularia
胶化，取苹果锈病(G.yamadai)和梨锈病(G.haraeanum)标本，观察症状特点，特别注意在转主寄主柏树上的症状，哪种孢子发生在柏树上?该菌是否有夏孢子阶段?取苹果锈病菌制备片或梨胶锈菌冬孢子制备片231，注意该属的上述特点。（4）多胞锈菌属(Phragmidium)冬孢子单生，具长柄，大而显著，柄的下部膨大，3至多细胞，壁游动孢子鞭毛厚，表面光滑或有瘤状突起、观察玫瑰锈病(P.rosaemultiflorae)标本，镜检其制备片，注意该属菌上述特点。（二）黑粉菌目 1、黑粉菌科
稻粒黑粉病是由稻尾孢黑粉菌侵染引起的真菌病害，全国各主要稻区都有发生，尤其在杂交稻制种田受害更甚。 [诊断]该病危害穗部，一般仅个别小穗受害，病粒外表带污绿色或污黄色，内部隐约显示有黑色物，成熟时腹部裂开露出圆锥形黑色角状物，病谷全部或部分被黑粉代替，有些病粒呈暗绿色，不开裂，似青秕谷，手捏有松软感，内部充满黑粉(冬孢子)。 [发病规律]病菌孢子在土壤中或种子内外越冬为主，翌年萌发产生担孢子或次生担孢子，随气流传播至花器、子房或幼嫩的谷粒上萌发侵入。水稻扬花至灌浆
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