- ¥1490
- 联迈生物
- LM13-4200
- 中国/上海
- 2025年12月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Ramularia beticola
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
50次
中文名称：甜菜叶斑病菌PCR试剂盒
英文名称：Ramularia beticola
规格：50次
运输：低温
保存：-20度
有效期：一年
货期：一周
产品及特点
1.即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
2.荧光定量 PCR 检测，反应特异性强。
3.提供阳性对照，便于分析实验结果。
4.PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳，本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
使用方法
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 stn 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
1.标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2.用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
3.先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
1.在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
2.换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5 拷贝/μL 的阳性对照。
3.换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。
4.NC 管中不加任何阳性对照。
5.从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值， 并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
一．PCR 检测（20 μL 体系）
1.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次）
注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照，其他荧光 PCR 仪器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX。
建议 PCR 反应参数（具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化）
3. 数据采集
按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm， 最大发射光谱在 530 nm。
四、数据处理
以 stn 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
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文献和实验水稻胡麻斑病是由平脐蠕孢霉菌侵染引起的真菌病害。 [诊断] 该病在水稻各生育期和地上各部位均可发生，以叶片发病最普遍，其次为谷粒、穗颈和枝梗等。叶片受害后初为小褐点，后扩大为椭圆形褐色病斑，因大小似胡麻籽，故称之为胡麻斑病。病斑边缘明显，外围常有黄色晕圈，后期病斑中央呈灰黄或灰白色。严重时病斑密生，常相联合，形成不规则大斑。谷粒上病斑与叶片上病斑相似，可扩展至全谷粒，湿度大时内外颖合缝处及谷粒表面产生大量黑色绒毛状霉层。穗颈和枝梗受害，症状与稻瘟病相似，但病部呈深褐色，变色部
由稻梨孢（稻瘟病菌）侵染水稻后引起的一种为害最严重的病害。稻瘟病菌属于真菌门、半知菌纲。该病菌的菌丝体有隔，可侵害水稻的各部分，引起苗瘟、叶瘟、节瘟、穗颈瘟和谷粒瘟。南方稻区的苗瘟和叶瘟较多，北方稻区谷粒瘟和穗节瘟较多。苗瘟时，初期在苗上出现灰绿色斑点，以后全苗变成黄褐色而枯死。叶瘟的病斑梭形，边绿黄褐色，中央灰色，常汇合成不规则形状，叶背面可见灰色霉状物，即其分生孢子。节部为黑色小斑点，渐逐扩大，最后病节变成黑色，干枯，易从此处折断。在抽穗后，穗颈上发生黑色病斑，易从病处折断，以至全穗
，仍可看见联合的大病斑是由许多透明小条斑融合而成的。病菌形态与白叶枯病菌相似，但生长快，水解明胶和淀粉能力强。 [发病规律] 病菌主要在病稻谷和病稻草上越冬，成为翌年初侵染来源。主要通过灌溉水、雨水等传播，从气孔或伤口侵入。高温、高湿、多雨是病害流行的主要条件，台风、暴雨、氮肥偏施或使用偏迟有利于病害发生。 [防治]主要参照稻白叶枯病。值得注意的是： (1)严格实行检疫，不从病区调种。 (2)更加强调种子处理，可用85％强氯精300倍液浸种，先将稻种用清水
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